目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>源性成分PCR試劑盒>> 50T羊源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
產(chǎn)品名稱:羊源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
規(guī)格: 48T
貨號:BK-P97204
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
注意事項:產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
甲; 甲基素17-Methyltestosterone質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠酸脫氫酶β(PDHβ)ELISA試劑盒 ,英文名: PDHβ ELISA Kit ELISAKiANKL小鼠核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96T
四氫生物蝶呤游離堿Tetrahydro-L-Biopterin free base質(zhì)量規(guī)格:>99% 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA檢測試劑盒Humanadvancedoxidationproteinproducts,AOPPELISAKit 96T/4
結(jié)晶Crystalline質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 精漿蛋白(semenplasmaprotein)萃取試劑盒20 有絲分裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)ELISA試劑盒 ,英文名: MAPK14 ELISA Kit
Delta-催激素Delta-MSH質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitKim-1人腎損傷分子1規(guī)格:48T/96T Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA試劑盒雞17羥皮質(zhì)類(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
內(nèi)皮素2,人,犬Endothelin 2 (human, canine)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 ,英文名: M2-PK ELISA Kit ELISAKitCasp-3小鼠胱天蛋白酶3規(guī)格:48T/96T
內(nèi)皮素3,人,大鼠Endothelin 3, human, rat質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠鈣調(diào)1酸酶(CaN)ELISA檢測試劑盒Ratcalcineurin,CaNELISAKit 96T/48T HumanAdenosinediphosphate,ADPELISAKit人二1酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2亞甲基二水楊酸(異構(gòu)體的混合物)(>90.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(T)Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers)
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化);PC-12(低分化) 肝癌細(xì)胞,BEL-7402細(xì)胞 D3細(xì)胞,129小鼠ES細(xì)胞2-氨基-2',5-二氯二苯甲酮(>98.0%(N))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞 Human4-1丙氧基-2-羥基二苯甲酮(>97.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone
CST4 Others Human 人 CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(T)3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride
人無色素睫狀上皮細(xì)胞 cDNAHNPCEpiC cDNA10-去乙酰巴卡丁III質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口10-Deacetylbaccatin-III
羊源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法人氣管上皮細(xì)胞RNAHTEpiC miRNA5 μg五肽促胃液素,英文名或英文縮寫:Pentagastrin,級別:BR,98%,規(guī)格:100克
狗間葉干細(xì)胞(脂肪)(5×105)谷轉(zhuǎn)酶 Glutamic-Pyruvic Transaminase(≥75 uni... 9000-86-6 200UN 通用試劑
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2酰炳同鐵 99.9+% Fqrric ccqtylccqtonctq 1404-18-1
615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS 小鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL2-Eth
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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