目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>源性成分PCR試劑盒>> 48T 0.2PCR管馬、驢源性核酸檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法
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更新時(shí)間:2024-01-02 08:21:06瀏覽次數(shù):440評(píng)價(jià)
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產(chǎn)品名稱:馬、驢源性核酸檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法
規(guī)格: 48T 0.2PCR管
貨號(hào):BK-P97211
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
甲氨蝶呤二鈉鹽 Methotrexate di 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 英文名稱HumanIerleukin-11(IL-11)ELISAKIT人白介素-11(IL-11)規(guī)格:96T/48T 人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
甲氨蝶呤二鈉鹽 (標(biāo)準(zhǔn)品)Methotrexate di 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 動(dòng)物脂肪組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體β(PPAR-β)試劑盒 Mouse P
膠原酶I型(sigma)Collagenase, Type1質(zhì)量規(guī)格:≥125 CDU/mg ,Sigma分裝 小鼠速激肽受體2(TACR2)ELISA試劑盒 ,英文名: TACR2 ELISA Kit ELISAKitBMPR-1A小鼠骨成型蛋白受體1A規(guī)格:48T/96T
膠原酶II型(sigma)Collagenase, Type2質(zhì)量規(guī)格:≥125 CDU/mg ,Sigma分裝 豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 96T/48T HumanactivatedproteinCresistance,APCRELISAKit人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
膠原酶IV型(sigma)Collagenase, TypeIV質(zhì)量規(guī)格:≥160 CDU/mg,Sigma分裝 牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子2(FGF2)試劑盒 Bovine Heparin-binding growth factor 2,FGF2 ELISA kit 人抗菌肽(Attacin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鉬酸鈉二水(AR) molybdate質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein4ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)4(BMP-4)規(guī)格:96T/48T 小鼠抗IgE受體抗體試劑盒 Mouse ai-IgE receptor aibody ELISA Kit
人心肌細(xì)胞-cDNAHCM-a cDNA2'-羥基查耳酮(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2'-Hydroxychalcone
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)(5×105)4-二甲基氨基-4'-硝基茋(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)4-Dimethylamino-4'-nitrostilbene
大鼠骨髓瘤細(xì)胞;IR983F4-甲氧基-4'-硝基芪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)4-Methoxy-4'-nitrostilbene
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 小鼠牙細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL5-硝基尿嘧啶(>99.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T)5-Nitrouracil
LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 Human2-羥基阿托伐他汀單鈉鹽二水合物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口2-Hydroxy Atorvastatin Dihydrate Mono Salt
馬、驢源性核酸檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2酸500克
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-(2-羌基本基)本并惡坐 2-(2-xy7noXYPHqNYL)BqNZOXcZOLq 832-64-3
人腎皮層上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL氫氧化鎘100毫克
B16-Fo細(xì)胞,鼠色素瘤細(xì)胞系 WI-38(胚肺細(xì)胞) 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)1,4-雙(5-本基-2-噁唑基)本shēng huà shì jì容量:2.5升
CCL8 Protein
注意事項(xiàng):產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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