目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>源性成分PCR試劑盒>> 48T馬、驢源性核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
注意事項(xiàng):產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱:馬、驢源性核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
規(guī)格: 48T
貨號:BK-P97210
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
甲氨蝶呤-甲基-d3Methotrexate-methyl-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 DuckIerleukin-4,IL-4ELISA試劑盒鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4'-羥基尼美舒利4'-Hydroxy Nimesulide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 藻類菌脂質(zhì)綠色熒光染色試劑盒20 小鼠降鈣素原(PCT)試劑盒 Mouse Procalcitonin,PCT ELISA K
膠原酶I型(sigma)質(zhì)量規(guī)格:≥125 CDU/mg ,Sigma分裝Collagenase, Type1 HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISA試劑盒人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 雞壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
膠原酶II型(sigma)質(zhì)量規(guī)格:≥125 CDU/mg ,Sigma分裝Collagenase, Type2 植物種子活性葉綠體分離試劑盒20 人載脂蛋白C3(Apo-C3)試劑盒 Human Apo-C3 ELISA Kit
膠原酶IV型(sigma)質(zhì)量規(guī)格:≥160 CDU/mg,Sigma分裝Collagenase, TypeIV Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit人T細(xì)胞急性母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒 ,英文名: HLA-C ELISA Kit
鉬酸鈉二水(AR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR molybdate 小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒 ,英文名: H ELISA Kit RatCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人上皮細(xì)胞;Ca Ski一鹽基嶙酸,英文名或英文縮寫:Ammonium dixy7nogen phosphate,級別:AR;99%,規(guī)格:25克
人肝間充質(zhì)干細(xì)胞(肝)(HMSC-HE)(5×105)地塞米1酸鈉 Dexamethasone phosphate 2392-39-4 1G 通用試劑
CM-R016大鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL高錄醋(*)(易制暴) litxium pqrchlorctq trihydrctq 13423-78-6
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL錫青銅shēng huà shì jì容量:250克
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 MousePH緩沖液 PH11.0(20℃)NA
馬、驢源性核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)外消旋左旋甲狀腺素鈉質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口DL-Levothyroxine
ZR-75-30(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2β-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate salt
人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHAEC NA硫酸腺嘌呤二水化合物質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Adenine
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)