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更新時(shí)間:2021-08-12 09:04:29瀏覽次數(shù):413評(píng)價(jià)
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免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!
英文名稱(chēng) Anti-C3orf17
中文名稱(chēng) C3orf17抗體
別 名 Chromosome 3 open reading frame 17; hypothetical protein LOC25871; CC017_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 65kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C3orf17
亞 型 IgG
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
(-)無(wú)熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見(jiàn);(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽(yáng)性。
兔磷脂酰肌蛋白聚糖2(GPC2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Irbesartan膠柱頭孢霉屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族2成員C(CLEC2C)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 IrbesartanPaenibacillus taichungensis拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
兔磷脂爬行酶2(PLSCR2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒對(duì)羧苯磺酰植物乳桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
兔T特異性鳥(niǎo)苷三磷酶(Tgtp)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒對(duì)羧苯磺酰大腸埃希氏菌拉丁屬名: Janthinobacterium lividum
兔白分化抗原28(CD28)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒對(duì)羧苯磺酰深藍(lán)紫色桿菌拉丁屬名: coli
兔嗜中性粒防御素α1(DEFα1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒N-乙-3-吲哚大腸埃希菌拉丁屬名: Ustilago maydis
兔V型膠原α2(COL5α2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 N-乙-3-吲哚玉米黑粉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔核糖體蛋白L10(RPL10)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硫鋱(III) 八水合物香菇Cr04拉丁屬名: Escherichia coli
兔TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答因1(TIEG1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 硫鋱(III) 八水合物大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Fusarium oxysporum
兔白介素22(IL-22)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒六銠(III)尖孢鐮孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔狀旁腺激素樣蛋白(PLP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-頻哪酯彩色豆馬勃拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens
兔胎盤(pán)鈣黏蛋白(P-Cadherin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-頻哪酯熒光假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔5羥吲哚乙(5-HIAA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 (R,R)-DACH-苯 Trost 配體尖孢鐮刀菌拉丁屬名: Pleurotus platypodus (Cke.et Mass) Sacc.
兔纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 (R,R)-DACH-苯 Trost 配體扁柄側(cè)耳拉丁屬名: Monascus anka
兔波形蛋白(VIM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Galantide紅曲紅曲注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔超氧化物歧化酶1(SOD1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒白屈氨水合物褐囊蜜環(huán)菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
C3orf17抗體兔血小板衍生生長(zhǎng)因子D(FDGFD)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒FS ELISA Kit 大鼠卵泡抑素
兔唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素8(SIGLEC8)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒HD ELISA Kit 大鼠組織蛋白去乙?;?/span>
兔蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒E-Selectin/CD62E ELISA Kit 大鼠E選擇素
兔EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Methylase ELISA Kit 大鼠甲化酶
兔生長(zhǎng)激素受體(GHR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒PCNA ELISA Kit 大鼠抗增殖核抗原抗體
兔核糖核酸酶(RNASE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 LPL ELISA Kit 大鼠脂蛋白脂酶
兔胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒TRACP-5b ELISA Kit 大鼠抗酸性磷酸酶5b
兔蛋白酪氨酸磷酸酶受體K(PTPRK)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒GIP ELISA Kit 大鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽
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