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更新時(shí)間:2021-08-12 09:28:01瀏覽次數(shù):507評(píng)價(jià)
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免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!
英文名稱 Anti-CXCL9/MIG
中文名稱 CXCL9/MIG抗體
別 名 MIG; CMK; C-X-C motif chemokine 9; CXCL9; chemokine (C-X-C motif) ligand 9; crg-10; Humig; monokine induced by gamma interferon; SCYB9; Small inducible cytokine B9; small inducible cytokine subfamily B member 9.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 14kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CXCL9 C-terminus
亞 型 IgG
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
(-)無(wú)熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見(jiàn);(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽(yáng)性。
豚鼠乳脫氫酶C(LDHC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-氨-4-并噻唑假芽胞桿菌屬拉丁屬名: Streptomyces hiroshimensis
豚鼠破骨相關(guān)受體(OSCAR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-氨-4-并噻唑廣島鏈霉菌拉丁屬名: Paenibacillus tianmuensis
豚鼠Bcl2同源拮抗劑1(BAK1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吲哚-3-乙天目山類芽孢桿菌用途: 分類、研究,具有處理養(yǎng)殖廢水潛力。
豚鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GRα)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 吲哚-3-乙邊緣假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
豚鼠補(bǔ)體因子1R(Clr)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吲哚-2-羧聚生殼菌拉丁屬名: Debaryomyces hansenii
豚鼠質(zhì)裂解蛋白/質(zhì)溶素(MAT)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吲哚-2-羧漢遜德巴利酵母 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
豚鼠蕈型乙酰膽受體(M-AChR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 1,3-苯二粉紅單端孢霉拉丁屬名: Lactococcus lactis
豚鼠絲裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1,3-苯二乳乳球菌拉丁屬名: Arthrobacter protophormiae
豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1,3-苯二原玻璃蠅節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter nicotinovorans
豚鼠F-框蛋白2(FBXO2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Fmoc-O-磷-L-酪氨噬尼古丁節(jié)桿菌拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
豚鼠血管舒緩激肽(BK)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-氧-4-(2-氨乙)苯酚嗜熱鏈球菌拉丁屬名: Ramlibacter tataouinensis
豚鼠磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒DL-阿拉伯糖Ramlibacter tataouinensis 拉丁屬名: Pseudomonas azotoformans
豚鼠水通道蛋白2(AQP-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 DL-阿拉伯糖產(chǎn)氮假單胞菌(可定)拉丁屬名: Bacillus mojavensis
豚鼠β甘露糖苷酶(β Manase)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 DL-阿拉伯糖莫哈韋芽孢桿菌拉丁屬名: Hypocrea virens
豚鼠黑素瘤黏附分子(MCAM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒N-Acetyl-Val-Ala-Asp-al變綠肉座菌拉丁屬名: Saccharomyces exiguus
豚鼠黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4,4′-(六氟異亞)二酚少孢酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
CXCL9/MIG抗體豚鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 sRANKL ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配
豚鼠通用轉(zhuǎn)錄因子II A肽1(GTF2A1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒TSH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素
豚鼠轉(zhuǎn)錄激活因子-1(ATF-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Cortisol ELISA Kit 大鼠皮質(zhì)
豚鼠胸腺肽β4(TMSβ4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒E2 ELISA Kit 大鼠雌二
豚鼠前列腺素D2合成酶(PGD2S)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒T ELISA Kit 大鼠睪酮
豚鼠β肌動(dòng)蛋白(β-actin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 F-TESTO ELISA Kit 大鼠游離睪酮
豚鼠胰腺再生蛋白3α(REG3α)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒ASD ELISA Kit 大鼠雄烯二酮
豚鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 E3 ELISA Kit 大鼠雌三
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