張經(jīng)理
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當(dāng)前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測(cè)試劑盒>> 22803Cell Meter 線粒體膜電位近紅外檢測(cè)試劑盒
參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)22803
品 牌AAT Bioquest
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地西安市
更新時(shí)間:2024-01-31 10:18:39瀏覽次數(shù):99次
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Portelite 快速熒光法內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒
Portelite 快速熒光法內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒
我們的Cell Meter 線粒體膜電位近紅外檢測(cè)試劑盒 是一套用于檢測(cè)細(xì)胞生存力的工具。有多種參數(shù)可用于檢測(cè)細(xì)胞活力。該特定試劑盒旨在通過測(cè)量線粒體膜電位的喪失來監(jiān)測(cè)細(xì)胞凋亡。線粒體膜電位的崩潰與線粒體通透性過渡孔的開放相吻合,導(dǎo)致*釋放到細(xì)胞質(zhì)中,進(jìn)而觸發(fā)凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的其他下游事件。我們的Cell Meter NIR線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒為所有必需成分提供了優(yōu)化的測(cè)定方法,可檢測(cè)線粒體膜電位喪失的細(xì)胞凋亡。該熒光測(cè)定法是基于我們專有的陽離子MitoLite NIR 染料對(duì)細(xì)胞中線粒體膜電位的檢測(cè)。在正常細(xì)胞中,MitoLite NIR 主要在線粒體中積累,但是在凋亡細(xì)胞中,MitoLite NIR 染色強(qiáng)度降低。用MitoLite NIR 染色的細(xì)胞可以在620-640 nm激發(fā)下在660-680 nm熒光下進(jìn)行檢測(cè)。該試劑盒可用于篩選凋亡激活劑和抑制劑。該測(cè)定可以以方便的96孔和384孔熒光微量滴定板形式進(jìn)行。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商,為您提供的Cell Meter 線粒體膜電位近紅外檢測(cè)試劑盒。
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡(jiǎn)要概述
準(zhǔn)備細(xì)胞
添加測(cè)試化合物
添加MitoLite NIR工作溶液(100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板)
在5%CO2的培養(yǎng)箱中于37°C孵育30-60分鐘
添加測(cè)定緩沖液B(50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板)
檢測(cè)Ex / Em = 640/680 nm(截止= 665 nm)的熒光強(qiáng)度(底部讀取模式)
溶液配制
工作溶液配制
將50 µL的200X MitoLite NIR(組分A)添加到10 mL的測(cè)定緩沖液A(組分B)中,并充分混合以制成MitoLite NIR工作溶液,避光。
操作步驟
1.用測(cè)試化合物處理細(xì)胞一段所需的時(shí)間,以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并建立平行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。
陰性對(duì)照:僅用載體處理細(xì)胞。
陽性對(duì)照:在37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中,以5-50 µM的濃度用FCCP或CCCP處理細(xì)胞15至30分鐘。 注意:CCCP或FCCP可以與MitoLite NIR同時(shí)添加。 為了獲得結(jié)果,可能需要為每個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞系滴定CCCP或FCCP。
2.在添加MitoLite NIR工作溶液之前,請(qǐng)去除細(xì)胞培養(yǎng)基。注意:在添加MitoLite NIR工作溶液之前,必須除去細(xì)胞培養(yǎng)基。
3.將100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板的MitoLite NIR工作溶液添加到細(xì)胞板中。
4.在37°C,5%CO2的培養(yǎng)箱中避光放置30-60分鐘。注意:適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于所用的單個(gè)細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。
5.在檢測(cè)熒光信號(hào)之前,將50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板的測(cè)定緩沖液B(組分C)加入細(xì)胞板。注意:加載后請(qǐng)勿洗滌細(xì)胞。對(duì)于非貼壁細(xì)胞,建議在加入測(cè)定緩沖液B(組分C)后,以800 rpm離心細(xì)胞板2分鐘,然后制動(dòng)。
6.加入測(cè)定緩沖液B(組分)10到30分鐘后,使用熒光酶標(biāo)儀(底部讀取模式)(Ex / Em = 640/680 nm(Cutoff = 665 nm))檢測(cè)熒光強(qiáng)度。
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