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西安百螢生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測(cè)試劑盒>> 22845Cell Meter 熒光法細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒

Cell Meter 熒光法細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)22845

品       牌AAT Bioquest

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地西安市

更新時(shí)間:2024-01-31 11:23:40瀏覽次數(shù):138次

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Cell Meter 熒光法細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒 該特定試劑盒旨在通過(guò)在活細(xì)胞中使用我們專有的Nuclear Violet 檢測(cè)細(xì)胞周期的進(jìn)程和增殖。

Cell Meter 熒光法細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒 細(xì)胞周期具有四個(gè)連續(xù)階段:G0 / G1,S,G2和M。在細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞周期的過(guò)程中,其DNA在S(合成)階段復(fù)制,并在M(有絲分裂)階段在兩個(gè)子細(xì)胞之間平均分配。這兩個(gè)階段由兩個(gè)間隙階段分開(kāi):G0 / G1和G2。這兩個(gè)間隙相為細(xì)胞提供了生長(zhǎng)時(shí)間,并使它們的蛋白質(zhì)和細(xì)胞器的質(zhì)量增加了一倍。在進(jìn)入下一階段的細(xì)胞周期之前,細(xì)胞還將它們用于檢測(cè)內(nèi)部和外部條件。細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞周期的傳遞受到許多不同調(diào)節(jié)蛋白的控制。該特定試劑盒旨在通過(guò)在活細(xì)胞中使用我們專有的Nuclear Violet 檢測(cè)細(xì)胞周期的進(jìn)程和增殖??梢酝ㄟ^(guò)流式細(xì)胞術(shù)確定給定樣品中處于G0 / G1,S和G2 / M期的細(xì)胞以及亞G1期處于凋亡之前的細(xì)胞的百分比??梢杂昧魇郊?xì)胞儀(PacificBlue®通道)檢測(cè)用Nuclear Violet 染色的細(xì)胞。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商,為您提供的Cell Meter 熒光法細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

  1. 用5×105至1×106細(xì)胞/ mL的密度制備含測(cè)試化合物的細(xì)胞

  2. 在0.5 mL細(xì)胞溶液中加入1 µL 500X Nuclear Violet

  3. 在室溫下孵育30-60分鐘

  4. 使用405nm紫色光激發(fā)流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析


實(shí)驗(yàn)步驟

1.對(duì)于每個(gè)樣品,請(qǐng)?jiān)?.5 mL的溫暖培養(yǎng)基或自備緩沖液中以5×105至1×106細(xì)胞/ mL的密度制備細(xì)胞。注意:應(yīng)單獨(dú)評(píng)估每種細(xì)胞系,以確定誘導(dǎo)凋亡的細(xì)胞密度。

2.用測(cè)試化合物處理細(xì)胞,以誘導(dǎo)凋亡或其他細(xì)胞周期功能。

3.向含有生長(zhǎng)培養(yǎng)基的細(xì)胞中加入1µL 500X Nuclear Violet (組分A),并在37°C,5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育細(xì)胞30至60分鐘。注意:對(duì)于貼壁細(xì)胞,用0.5mM EDTA輕輕提起細(xì)胞以保持細(xì)胞完整,并在用Nuclear Violet 孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌一次。注意:適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于所用的單個(gè)細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。注意:DNA染色前無(wú)需固定細(xì)胞,因?yàn)镹uclear Violet 具有細(xì)胞滲透性。

4.可選:以1000 rpm離心細(xì)胞4分鐘,然后將細(xì)胞重懸于0.5 mL檢測(cè)緩沖液(組分B)或自備緩沖液中。

5.使用405 nm紫色激光(Ex / Em = 405/445 nm)通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光強(qiáng)度



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