張經(jīng)理
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當(dāng)前位置:西安百螢生物科技有限公司>>常用蛋白>> 19501ReadiUse 去除樣本蛋白試劑盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號19501
品 牌AAT Bioquest
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地西安市
更新時間:2024-02-01 10:21:14瀏覽次數(shù):293次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線張經(jīng)理
ReadiUse 去除樣本蛋白試劑盒 氨基酸,離子,代謝物和其他小分子的分析經(jīng)常受生物流體,細(xì)胞和組織裂解物中存在的脂質(zhì),蛋白質(zhì)和酶的干擾而阻礙。 因此,在生物樣品分析之前,脫蛋白是許多程序中的必要步驟。 AAT Bioquest的脫蛋白樣品制備試劑盒提供了一種快速去除生物樣品中蛋白質(zhì)的方法。 通過應(yīng)用三(TCA)沉淀蛋白質(zhì)。 除去沉淀的蛋白質(zhì)后,用中和溶液中和樣品的pH。 基于TCA的脫蛋白已成功且廣泛用于樣品制備之前,對小分子(例如糖原,ATP,cAMP,*和抗氧化劑)進(jìn)行定量。 該試劑盒中提供的TCA方法也可用于大規(guī)模去除蛋白質(zhì)。 使用ReadiUse 去除樣本蛋白試劑盒 制備的生物樣品可直接用于各種生化分析。
樣品實(shí)驗(yàn)方案
1.蛋白質(zhì)沉淀:
1.1均質(zhì)和離心后,制備蛋白濃度小于50 mg / mL的澄清溶液樣品。 將蛋白質(zhì)樣品放在冰上。 注意:高蛋白濃度的樣品可能需要稀釋。
1.2向100 µL蛋白質(zhì)樣品中加入10 µL冷的TCA(組分A)并短暫渦旋混合均勻。
1.3將樣品在冰上放置10分鐘。 以12,000 rpm離心5分鐘。 將上清液(去蛋白樣品)轉(zhuǎn)移到另一個試管中。 注意:建議中和TCA中的樣品,并立即用于相關(guān)測定。 但是,TCA中的脫蛋白樣品可以在-70°C下保存長達(dá)一個月。
2.TCA中和:
2.1要中和過量的三氯yi酸,可在收集的上清液中加入10 µL冷中和溶液(組分B),并短暫渦旋混合均勻。
2.2將樣品在冰上放置5分鐘。 現(xiàn)在將樣品脫蛋白并中和。
2.3(可選)讀取280 nm(OD)處的吸光度以檢查樣品是否脫蛋白。
樣品示例
添加TCA和中和溶液(總體積約120 µL)可稀釋原始樣品(初始樣品體積為100 µL)中的蛋白質(zhì)濃度。 稀釋系數(shù)可以通過以下公式計算:
原始蛋白質(zhì)濃度%=(初始樣品體積)/(初始樣品體積+ TCA體積+中和溶液體積)
圖1.基于TCA的蛋白質(zhì)樣品的脫蛋白。 使用ReadiUse TCA脫蛋白測試樣品制備試劑盒(Cat#19501)對蛋白濃度低于50 mg / mL的牛血清白蛋白(BSA)樣品和約14.2 mg / mL的兔血清樣品進(jìn)行脫蛋白處理。 用TCA方法去除了所有樣品中超過98%的蛋白質(zhì)。 |
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