Cell Explorer 活細(xì)胞標(biāo)記試劑盒 紅色熒光是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于標(biāo)記活細(xì)胞的試劑盒，我們的Cell Explorer 熒光成像試劑盒是一套用于標(biāo)記細(xì)胞的工具，用于細(xì)胞功能的熒光顯微鏡檢查。細(xì)胞的有效標(biāo)記為在空間和時間背景下研究細(xì)胞提供了有力的方法。該特定試劑盒旨在以紅色熒光均勻標(biāo)記活細(xì)胞。該試劑盒使用專有的非熒光染料，在進(jìn)入活細(xì)胞后變?yōu)閺?qiáng)熒光。染料是一種疏水化合物，很容易滲透完整的活細(xì)胞。通過細(xì)胞內(nèi)酯酶水解非熒光底物產(chǎn)生強(qiáng)烈紅色的熒光親水產(chǎn)物，其在細(xì)胞質(zhì)中良好地保留。在黑色板中生長的細(xì)胞可以在不到兩小時內(nèi)染色和定量。該測定比四唑鹽或基于Alarmar Blue 的測定更穩(wěn)定。它可以很容易地適用于各種熒光平臺的高通量測定，例如微孔板測定，免疫細(xì)胞化學(xué)和流式細(xì)胞術(shù)。它可用于多種研究，包括細(xì)胞粘附，趨化性，多藥耐藥性，細(xì)胞活力，細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性。該試劑盒提供所有必需組件和優(yōu)化的細(xì)胞標(biāo)記方案。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的Cell Explorer 活細(xì)胞標(biāo)記試劑盒 紅色熒光。

實(shí)驗(yàn)方案

操作方法

簡要概述

1.在生長培養(yǎng)基中制備細(xì)胞
2.添加Calcein Red 工作溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）
3.將細(xì)胞在37℃下染色30分鐘至2小時
4.清洗細(xì)胞
5.在熒光顯微鏡下用Cy5過濾器檢測樣品（Ex / Em = 646/660 nm）

溶液配制

1.儲備溶液配制

       除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。

Calcein Red 原液：
將20μLDMSO加入到Calcein Red （組分A）的小瓶中并充分混合以制備Calcein Red 儲備溶液。 避光。 注意：20μLCalceinRed 儲備液足以容納1個平板。

2.工作溶液配制

       將20μLCalceinRed 儲備溶液加入10 mL HHBS（組分B）中，充分混合，制成Calcein Red 工作溶液。 避光。有關(guān)細(xì)胞樣品制備的指南，請點(diǎn)擊查看

樣品實(shí)驗(yàn)方案

1.從細(xì)胞板上除去生長培養(yǎng)基。 注意：重要的是去除生長培養(yǎng)基以最小化背景熒光并增加信號與背景比。

2.將100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）Calcein Red 工作溶液加入細(xì)胞板中。

3.將細(xì)胞在37℃，5％CO 2培養(yǎng)箱中孵育30分鐘至2小時。

4.從細(xì)胞中取出Calcein Red 工作溶液。

5.用HHBS（組分B）洗滌細(xì)胞2至3次，并用HHBS代替。

6.使用具有Cy5濾光片的熒光顯微鏡（Ex / Em = 646 / 660nm）對細(xì)胞成像。

數(shù)據(jù)分析

圖1.用Cell Explorer 活細(xì)胞標(biāo)記試劑盒染色的HeLa細(xì)胞圖像 在Costar黑色壁/透明底96孔板中的紅色熒光。