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Ex (nm)	509	Em (nm)	529

活細胞RNA成像試劑盒綠色熒光是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于標(biāo)記活細胞的試劑盒，對活細胞中的RNA分子進行檢測和成像對于多種分子生物學(xué)程序極為重要，包括物理運輸，遺傳信息解釋，基因表達調(diào)控和某些重要的生物催化作用。在活細胞中染色RNA的主要挑戰(zhàn)是DNA造成的干擾。為了解決該困難，開發(fā)了新型綠色熒光染料作為RNA選擇性探針。 AAT Bioquest的Cell Navigator 活細胞RNA成像試劑盒包括StrandBrite RNA Green，因為它能特異性結(jié)合細胞中的RNA。與用于體內(nèi)RNA染色的商用SYTO®RNA Select染料相比，StrandBrite RNA Green顯示出更亮的信號和對RNA的更好的選擇性。此外，該試劑盒可對活細胞和固定細胞中的RNA進行染色。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的活細胞RNA成像試劑盒綠色熒光 光學(xué)成像。

適用儀器

熒光顯微鏡
Ex:	490 nm
Em：	520 nm
推薦孔板:	黑色透明底板
濾波片組:	FITC 濾波片組

實驗方案

樣品實驗方案

簡要概述

1.準(zhǔn)備細胞
2.添加StrandBrite RNA Green工作溶液
3.孵育30-60分鐘
4.在Ex / Em = 490/520 nm（FITC濾光片組）的熒光顯微鏡下分析細胞

樣品示例及操作

1.根據(jù)特定的誘導(dǎo)方案將細胞培養(yǎng)至適合成像的密度（約1-2×104個細胞/孔/ 96孔板）。

2.對于活細胞：將室溫下用培養(yǎng)基或活細胞染色緩沖液（組分B）中稀釋400倍的StrandBrite RNA Green（組分A）孵育細胞30-60分鐘（100 µL /孔）。注意：25 µL StrandBrite RNA Green（組分A）足以容納一個96孔板。避光并避免重復(fù)的凍融循環(huán)。合適的孵育時間取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。有關(guān)詳細信息，請參見圖1。

3.對于固定細胞：在室溫下用純甲醇固定細胞1分鐘，然后用PBS洗滌。將細胞浸入1％Triton-100中2分鐘，然后用PBS洗滌兩次。在室溫下，用PBS中1X濃度的StrandBrite RNA Green（組分A）孵育細胞15-30分鐘。注意：建議增加標(biāo)記濃度或孵育時間，以使染料在細胞未充分染色的情況下積累。有關(guān)詳細信息，請參見圖1。

4.（可選）用PBS洗滌細胞1-2次，然后向每個孔中加入100 µL PBS。

5.使用熒光顯微鏡在Ex / Em = 490/520 nm（FITC通道）上監(jiān)控?zé)晒鈴姸取?/span>

圖1. HeLa細胞中RNA染色的熒光圖像。（A）使用Cell Navigator 活細胞RNA成像試劑盒（綠色，目錄號22630）對活細胞染色，并用Hoechst 33342（藍色，目錄號17530）復(fù)染。（B）使用相同試劑盒將固定在甲醇中的細胞染色。（C）染色后，將固定的HeLa細胞與0.5 mg / mL RNase在37oC下孵育1小時。 RNase消化測試的圖像表明StrandBrite RNA Green具有很高的選擇性。使用帶有FITC濾光片的熒光顯微鏡測量綠色熒光信號。

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱	貨號
Cell Navigator 活細胞微管蛋白染色試劑盒	Cat#23170

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