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Ex (nm)	503	Em (nm)	511
分子量	N/A

活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色試劑盒綠色熒光 是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色試劑盒，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）是真核生物細(xì)胞中的一種細(xì)胞器，其形成扁平的，膜封閉的囊或稱(chēng)為池狀的管狀結(jié)構(gòu)的互連網(wǎng)絡(luò)。 ER的膜與外核膜連續(xù)。 ER在大多數(shù)類(lèi)型的真核細(xì)胞中發(fā)生，但在紅細(xì)胞和中不存在。 Cell Navigator 活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）染色試劑盒使用我們的ER Tracer Green作為ER標(biāo)記物。 ER Tracer 綠色染料是一種細(xì)胞滲透性熒光染料，對(duì)ER具有高度選擇性。該染色劑由綠色熒光染料和ER組成，其在大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型中選擇性地結(jié)合ER。對(duì)于某些細(xì)胞，ER Tracer Green可能無(wú)法選擇性地與ER結(jié)合。 ER Tracer Green具有與FITC基本相同的光譜特性，使該試劑盒便于使用FITC濾光片組。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供的活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色試劑盒綠色熒光 。

適用儀器

熒光顯微鏡
Ex:	490 nm
Em：	520 nm
推薦孔板:	黑色透明底板
濾波片組：	FITC 濾波片組

實(shí)驗(yàn)方案

樣本分析方案

簡(jiǎn)要概述

1.在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中制備細(xì)胞
2.用ER Green Green工作溶液在37oC孵育細(xì)胞15-30分鐘
3.在Ex / Em = 490 / 520nm（FITC濾光片組）下在熒光顯微鏡下分析細(xì)胞

溶液配制

1.儲(chǔ)備溶液配制

除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
ER Green 原液（500X）：
將20μLDMSO（組分C）加入到ER Green （組分A）的小瓶中并充分混合以制備500X ER Green 儲(chǔ)備溶液。注意：20μL的500X ER Green 原液足以容納一個(gè)96孔板。如果管子密封，未使用的500X ER Green 儲(chǔ)備溶液可以在≤-20oC下儲(chǔ)存兩周。避光。

2.工作溶液配制

將20μL500XER Green 儲(chǔ)備溶液加入10 mL活細(xì)胞染色緩沖液（組分B）中，充分混合，制成ER Green 工作溶液。該ER Green 工作溶液在室溫下穩(wěn)定至少2小時(shí)。避光。有關(guān)細(xì)胞樣品制備的指南，請(qǐng)點(diǎn)擊查看。

操作步驟

1.在細(xì)胞板中加入100μL/孔（96孔板）或50μL/孔（384孔板）的ER Green TM工作溶液。用37℃的工作溶液孵育細(xì)胞15-30分鐘，避光。注意：ER探針的濃度根據(jù)具體應(yīng)用而有所不同。濃度高于工作溶液可能對(duì)細(xì)胞有毒。可以根據(jù)特定細(xì)胞類(lèi)型和細(xì)胞或組織對(duì)探針的滲透性來(lái)修改染色條件。

2.在每個(gè)孔中移除ER Green 工作溶液。用物理相關(guān)緩沖液洗滌細(xì)胞三次。

3.染色后修復(fù)細(xì)胞（可選）。用4％甲醛固定細(xì)胞5-10分鐘。用物理相關(guān)緩沖液洗滌細(xì)胞三次。

4.使用具有FITC濾光片組（Ex / Em = 490 / 520nm）的熒光顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞中的熒光信號(hào)。

數(shù)據(jù)分析

圖1.使用具有FITC濾光片組的熒光顯微鏡在96孔黑壁透明底板中培養(yǎng)的HeLa細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）染色的熒光圖像。左：活細(xì)胞用ER-選擇性探針ER Green （Cat＃22635，Green），線(xiàn)粒體染料MitoLite Red FX600（Cat＃22677，Red）和細(xì)胞核染色Hoechst 33342（Cat＃17530，藍(lán)色）染色。右：用ER Green （Cat22635，Green）染色的活細(xì)胞用4％甲醛固定，并用F-肌動(dòng)蛋白染料iFluor 594-鬼筆環(huán)肽（Cat＃23122，紅色）和細(xì)胞核染色DAPI（Cat＃17507，藍(lán)色）標(biāo)記。）。