樣本分析方案

簡要概述

1.在生長培養(yǎng)基中制備細胞
2.用ER Green red工作溶液在37oC孵育細胞15-30分鐘
3.在Ex / Em = 590 / 620nm（Texas Red濾光片組）下在熒光顯微鏡下分析細胞

溶液配制

1.儲備溶液配制

       除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環(huán)。
ER Green 原液（500X）：
將20μLDMSO（組分C）加入到ER red （組分A）的小瓶中并充分混合以制備500X ER red 儲備溶液。 注意：20μL的500X ER red 原液足以容納一個96孔板。 如果管子密封，未使用的500X ER red 儲備溶液可以在≤-20oC下儲存兩周。 避光。

2.工作溶液配制

將20μL500XER red 儲備溶液加入10 mL活細胞染色緩沖液（組分B）中，充分混合，制成ER red 工作溶液。 該ER red 工作溶液在室溫下穩(wěn)定至少2小時。 避光。有關細胞樣品制備的指南，請點擊查看。

操作步驟

1.在細胞板中加入100μL/孔（96孔板）或50μL/孔（384孔板）的ER red 工作溶液。 用37℃的工作溶液孵育細胞15-30分鐘，避光。 注意：ER探針的濃度根據(jù)具體應用而有所不同。 濃度高于工作溶液可能對細胞有毒。 可以根據(jù)特定細胞類型和細胞或組織對探針的滲透性來修改染色條件。

2.在每個孔中移除ER red 工作溶液。 用物理相關緩沖液洗滌細胞三次。

3.染色后修復細胞（可選）。 用4％甲醛固定細胞5-10分鐘。 用物理相關緩沖液洗滌細胞三次。

4.使用具有Texas Red濾光片組（Ex / Em = 590 / 620nm）的熒光顯微鏡觀察細胞中的熒光信號。

數(shù)據(jù)分析