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當(dāng)前位置:西安百螢生物科技有限公司>>熒光探針>> 22645LysoBrite 溶酶體紅色熒光探針

LysoBrite 溶酶體紅色熒光探針

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號22645

品       牌AAT Bioquest

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-02-01 11:13:50瀏覽次數(shù):233次

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LysoBrite 溶酶體紅色熒光探針 可用于各種研究,包括細(xì)胞粘附,趨化性,多藥耐藥性,細(xì)胞活力,細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性。 它們適用于增殖和非增殖細(xì)胞,可用于懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞。

LysoBrite 溶酶體紅色熒光探針 用于標(biāo)記活細(xì)胞的溶酶體。專有的溶解性染料可能通過溶酶體pH梯度選擇性地積聚在溶酶體中。 溶質(zhì)指示劑是疏水性化合物,易于滲透完整的活細(xì)胞,并在進(jìn)入細(xì)胞后被捕獲在溶酶體中。 進(jìn)入溶酶體后,LysoBrite 試劑的熒光明顯增強。 可以使用熒光成像,高含量成像,酶標(biāo)儀熒光測定法或流式細(xì)胞術(shù)檢測熒光。 LysoBrite 橙色,紅色,深紅色和NIR試劑具有*的光穩(wěn)定性和優(yōu)異的細(xì)胞保留性,可用于各種研究,包括細(xì)胞粘附,趨化性,多藥耐藥性,細(xì)胞活力,細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性。 它們適用于增殖和非增殖細(xì)胞,可用于懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞。溶酶體是細(xì)胞器,其含有酸水解酶以分解廢物和細(xì)胞碎片。 溶酶體消化多余的或破舊的細(xì)胞器,食物顆粒和吞噬的病毒或細(xì)菌。 溶酶體周圍的膜允許消化酶在pH4.5下工作。 與微堿性胞質(zhì)溶膠(pH 7.2)相比,溶酶體的內(nèi)部是酸性的(pH 4.5-4.8)。 溶酶體通過質(zhì)子泵和氯離子通道從細(xì)胞質(zhì)中泵送質(zhì)子穿過膜來維持這種pH差異。LysoBrite 溶酶體紅色熒光探針 是美國AAT Bioquest研發(fā)的產(chǎn)品。

實驗方案

使用LysoBrite 染料的分析方案

概述

準(zhǔn)備細(xì)胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分鐘

洗滌細(xì)胞

在熒光顯微鏡下分析

注:該方案僅提供指南,應(yīng)根據(jù)您的具體需求進(jìn)行修改。

操作方法

1.制備溶酶體染色溶液:

1.1解凍 LysoBrite 染料至室溫。

1.2通過將20μL的500 X LysoBrite 染料稀釋到10 mL Hanks和20 mm Hepes緩沖液或緩沖液(HBSS)中,制備染料工作溶液。

注1:對于一個96孔板,20μL的LysoBrite 染料就足夠了。 在<-15℃下等分并儲存未使用的LysoBrite 染料儲備溶液。 保護(hù)它免受光照,避免反復(fù)凍融循環(huán)。

注2:熒光溶酶體指示劑的濃度根據(jù)具體應(yīng)用而變化。 可以根據(jù)特定細(xì)胞類型和細(xì)胞或組織對探針的滲透性來修改染色條件。


2.準(zhǔn)備和染色細(xì)胞:

2.1貼壁細(xì)胞:a.在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在裝有適當(dāng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)的蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞達(dá)到所需的匯合時,加入等體積的染料加工溶液(來自步驟1.2)。 b.將細(xì)胞在37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中孵育30分鐘。 c.用預(yù)熱(37℃)Hanks和20mM Hepes緩沖液(HBSS)或您選擇的緩沖液洗滌細(xì)胞兩次,用HBSS或生長培養(yǎng)基填充細(xì)胞孔。 d.使用配有所需濾光片組的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。

注意:如果細(xì)胞看起來沒有充分染色,建議增加標(biāo)記濃度或孵育時間以使染料積累。

2.2對于懸浮細(xì)胞:a.將等體積的染料加工溶液(來自步驟1.2)加入細(xì)胞中。將細(xì)胞在37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中孵育30分鐘。 b.用預(yù)熱(37℃)Hanks和20mM Hepes緩沖液(HBSS)或您選擇的緩沖液洗滌細(xì)胞兩次,用HBSS或生長培養(yǎng)基填充細(xì)胞孔。 c.使用配備有所需過濾器組的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。

注1:如果細(xì)胞看起來沒有充分染色,建議增加標(biāo)記濃度或培養(yǎng)時間以使染料積累。

注2:懸浮細(xì)胞可以附著在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)處理過的蓋玻片上,并作為粘附細(xì)胞染色(見步驟2.1)。







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