2×Taq PCR Mixture含上樣染料-rtqpcr- rna聚合酶全酶
貨號(hào) 規(guī)格 BDIT0048 5×1ml
【產(chǎn)品概述】 本產(chǎn)品為預(yù)混的含有優(yōu)化濃度的高純度 Taq DNA Polymerase、dNTPs、Mg 2+、反應(yīng)緩沖液和穩(wěn)定劑等 成分的即用型 2 倍濃度的 PCR 溶液。使用時(shí)只需加入 DNA 模板和引物,并用水稀釋至 1×。
本產(chǎn)品具有使用方便、靈敏度高、擴(kuò)增性能強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn),可減少人為誤差、節(jié)約操作時(shí)間、降低污染幾率,適合大規(guī)?;驒z測(cè)、快速克隆篩選、半定量 PCR 實(shí)驗(yàn)和微量 DNA 模板的檢測(cè)等。PCR 產(chǎn)物的 3’端附有一個(gè)突出的"A"堿基,純化后可直接用于 T 載體克隆。
本產(chǎn)品含染料(紅色),PCR 反應(yīng)完成后,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進(jìn)行電泳;也可經(jīng)過純 化處理,以用于酶切、連接、熒光測(cè)序等后續(xù)操作。紅色染料可指示電泳進(jìn)程,其遷移速度在 1% TAE 瓊 脂糖凝膠中與 300 bp 雙鏈 DNA 片段相近。
【產(chǎn)品組分】 2×Taq PCR Mixture 5×1ml 【保存條件】 -20℃恒溫保存兩年(0-25℃運(yùn)輸),避免反復(fù)凍融。
經(jīng)常使用,可置于 4℃保存至少六個(gè)月。
【使用方法】 用戶需自備的試劑:DNA 模板、引物 操作示例:以 20 µl PCR 反應(yīng)體系為例 2 / 2
1. PCR反應(yīng)體系的建立: DNA 模板* 1 μl 正向引物 (10 μM) 1 μl 反向引物 (10 μM) 1 μl 2×Taq PCR Mixture 10 µl ddH2O 7 μl
2. PCR反應(yīng)條件的設(shè)置: 94℃ 2 min 94℃ 30 sec 55~65℃ 30 sec 25~35 循環(huán) 72℃ 1min/1 kb 72℃ 5 min
? 模板量:10~1000 ng基因組DNA,1~30 ng質(zhì)粒,或1~2 μl RT-PCR反應(yīng)后的cDNA。
注意:以上舉例為常規(guī)PCR反應(yīng)系統(tǒng),僅供參考。具體的qpcr的cq和ct等實(shí)際反應(yīng)條件因模板、引物等的結(jié)構(gòu)不同而各異,需根據(jù)模板、引物、目的片段的特點(diǎn)設(shè)定反應(yīng)條件,并根據(jù)比例放大或縮小反應(yīng)體系。
3. 結(jié)果檢測(cè):取2 μl反應(yīng)液電泳觀察結(jié)果。qpcr的cq和ct
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