天根-石蠟包埋組織切片-總RNA提取試劑盒-DP439
產(chǎn)品簡介:
本試劑盒可從福爾馬林固定石蠟包埋組織切片(以下簡稱 FFPE)中提取總RNA 。由于固定和包埋的條件限制, FFPE樣本核酸通常發(fā)生片段化并且會被甲醛化學(xué)修飾,因此較難提取,本試劑盒提取的 RNA 可應(yīng)用于 RT-PCR 等下游試驗。
產(chǎn)品特點:
■ 采用硅基質(zhì)膜柱法純化方式,在可能的程度內(nèi)獲得的總RNA 純度更高、信息更為完整。
■ 相對于傳統(tǒng)方法,操作更為簡便、快捷。
■ 適用于下游的RT-PCR 或RT-qPCR 等實驗檢測。
產(chǎn)品應(yīng)用:
本品適用于從福爾馬林固定石蠟包埋組織切片( 簡稱FFPE) 中提取總RNA。
實驗例
使用前注意事項:
1. 次使用前應(yīng)在漂洗液RW中加入無水乙醇,加入量請參見瓶上標(biāo)簽。
2. DNase I儲存液的配制 將DNase I干粉(1500 U)溶解在550 μl RNase-Free ddH2O中,輕柔混勻,分裝后-20℃ 貯存(可保存9個月)。 注意:從-20℃融化后的DNase I儲存液保存于4℃(可保存6周),不要再次凍存。
起始材料 1. 標(biāo)準(zhǔn)的福爾馬林固定石蠟包埋程序也常常會造成核酸的片段化。為
了盡量降低RNA片段化的可能性,應(yīng)該按照以下操作步驟進(jìn)行樣本處理:
● 組織切除后應(yīng)盡快浸入4%-10%的福爾馬林溶液中;
● 固定時間為14-24 h(固定時間過長會導(dǎo)致RNA片段化更嚴(yán)重,不利于下游的試驗;
● 樣本包被之前必須脫水。
1. 應(yīng)采用新鮮的FFPE組織切片,切片厚度不超過10 μm,切片過厚可能會造成RNA得率低, 每次制備采用的切片數(shù)應(yīng)不超過8片,表面積應(yīng)不超過250 mm2 。
2. 如果沒有起始樣本的信息,建議初次制備采用的切片數(shù)應(yīng)不超過2片,然后根據(jù)RNA的得 率和純度,下次制備采用的切片數(shù)可以進(jìn)行調(diào)整,但應(yīng)不超過8片。
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