分光光度計(jì)是一類很重要的分析儀器,無論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門,都有廣泛而重要的應(yīng)用。紫外可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器。
紫外可見分光光計(jì)在條件設(shè)定時(shí)需注意的四個(gè)事項(xiàng):
(1)狹縫寬度
狹縫的寬度太大,入射光的單色性差狹縫的寬度太小,入射光的強(qiáng)度變?nèi)酢?狹縫寬度過大或過小會(huì)降低靈敏度,但選擇誤差小時(shí)的大狹縫。 一般的選擇設(shè)備的狹縫寬度琵琶度必須小于測量對(duì)象樣品的吸收帶的半值寬度。 否則測量的吸光度值會(huì)變低。 狹縫寬度的選擇在減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸光度消失。 除此之外,對(duì)于大部分被測量品種,可以使用2nm的縫制寬度。
(2)測定波長
在定量分析中,為了提高測定靈敏度,入射光的波長選擇被測定物的大吸收波長max,如果max有干擾,則可以選擇另外一個(gè)靈敏度稍低但避免干擾的譜線,因此通過適當(dāng)選擇入射光的波長,提高測定的靈敏度,
(3)空白溶液的選擇
空白溶液是用于調(diào)節(jié)吸光度測定的動(dòng)作零點(diǎn)即A=0、T=99%的溶液,用于消除溶液中的其他基質(zhì)成分、吸收單元和溶劑對(duì)入射光的反射和吸收所帶來的誤差。 根據(jù)情況,常用空白溶液有以下選擇。
只有溶劑空白溶液中的測定對(duì)象成分被測定波長吸收,其他成分不被吸收時(shí),可以用純?nèi)軇┛瞻住?/span>
試劑空白顯色劑和其他試劑被吸收,被檢體溶液不被吸收時(shí),用不添加被檢成分的其他試劑空白。
試樣空白試樣基體有吸收,顯色劑和其他試劑沒有吸收時(shí),用不添加顯色劑的試樣溶液空白。
(4)控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?/span>
通過控制被測量物的濃度、改變吸收單元的厚度,可以實(shí)現(xiàn)吸光度的適當(dāng)范圍,盡可能減小測量誤差。 一般吸光度需控制在0.1-0.8的范圍內(nèi)。