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ThermoBrite原位雜交儀

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隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，原位雜交在分子病理和科學(xué)研究方面得到了日益廣泛的推廣和應(yīng)用。在原位雜交和FISH實(shí)驗(yàn)中，變性溫度是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，也是確保原位雜交實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵步驟。NatureGene ThermoBrite原位雜交儀可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)者的設(shè)置，自動(dòng)完成變性和雜交過(guò)程。嚴(yán)格的溫度控制，適宜的濕度環(huán)境，加上低廉的成本，和時(shí)間上的節(jié)省，為分子水平的研究提供了可靠的保證。

詳細(xì)介紹

詳情介紹：

NatureGene ThermoBrite 原位雜交儀

原位雜交儀的***

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，原位雜交在分子病理和科學(xué)研究方面得到了日益廣泛的推廣和應(yīng)用。在原位雜交和FISH實(shí)驗(yàn)中，變性溫度是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，也是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵步驟。原位雜交儀可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)者的設(shè)置，自動(dòng)完成變性和雜交過(guò)程。嚴(yán)格的溫度控制，適宜的濕度環(huán)境，加上低廉的成本，和時(shí)間上的節(jié)省，為分子水平的研究提供了可靠的保證。
StatSpin ThermoBrite®系統(tǒng)ThermoBrite 原位雜交儀一次可處理12張玻片。全密封式上蓋設(shè)計(jì)保證了理想的溫度和濕度，系統(tǒng)保證了高度的溫度均一性，使得所有玻片溫差上下不超過(guò)1 ℃。玻片很容易用手取出或放入。利用數(shù)字觸碰面板可以簡(jiǎn)單快速的編輯40個(gè)用戶定義方案和3種操作模式：變性／雜交、雜交和固定溫度。

ThermoBrite 原位雜交儀是自然基因科技總代理產(chǎn)品，常年現(xiàn)貨供應(yīng)。

ThermoBrite 原位雜交儀特點(diǎn)：

· 一次可進(jìn)行12張切片的實(shí)驗(yàn)
· 反應(yīng)艙密封禁閉，溫度適宜
· **的溫控，溫室均勻一致
· 三種固定運(yùn)行模式
· 四十種自定義編輯程序
· 數(shù)字鍵盤操作，方便易行

ThermoBrite是原位雜交領(lǐng)域的**者，其上等的性能在廣大用戶中獲得了。

嚴(yán)格溫度控制
· 溫差在設(shè)定溫度±1℃
· 的溫度均一性
· 不受切片數(shù)量影響
· 理想的溫度控制

簡(jiǎn)單程序設(shè)置
· 40種使用者自定義的程序
· 3種已設(shè)置運(yùn)行模式
· 顯示屏隨時(shí)顯示實(shí)驗(yàn)條件，實(shí)驗(yàn)過(guò)程一目了然

操作簡(jiǎn)單方便
· 玻片取放容易，開(kāi)蓋即可操作
· 全部實(shí)驗(yàn)自動(dòng)化
· 數(shù)字鍵盤，使用方便。

系統(tǒng)指標(biāo)：

StatSpin ThermoBrite®系統(tǒng)---ThermoBrite 原位雜交儀

* 由于集成了（F）ISH處理步驟，減少了大量手工操作時(shí)間
* 避免有害試劑的傷害
* 無(wú)需將12張玻片全部放入，也可保持溫度均一性
* 玻片卡槽在位設(shè)計(jì)使得單手操作成為可能
* 節(jié)省試劑、節(jié)省人工、節(jié)省資金
* 薄膜式面板容易清潔
* 小體積設(shè)計(jì)
* 支持各種不同類型的樣本。

訂貨信息：

TS01	ThermoBrite Unit, 120 VAC 50-60 Hz
TS02	ThermoBrite Unit, 240 VAC 50-60 Hz
HC10	Humidity ControCards (10pk)

ThermoBrite原位雜交儀是世界***穩(wěn)定的該類儀器。

ThermoBrite 原位雜交儀參考文獻(xiàn)：

1. Barese Cecilia, Pech Nancy, Dircheri Sara, Meyers Justin, Sinn Anthony L., Yoder Mervin C., GoebeScott, Dinauer Mary C. "Granulocyte Colony-Stimulating Factor Prior to Nonmyeloablative Irradiation Decreases Murine Host Hematopoietic Stem CelFunction and Increases Engraftment of Donor Marrow Cells" The Stem CelNiche, March 2007; doi: 10. 1634/stemcell. 2006-0808

2. Kim Sungjin, Song Yun-Jeong, Higuchi DarryA., Kang Hyunseok P., Pratt Jennifer R., Yang Liping, Hong Caron M., Poursine-Laurent Jennifer, Iizuka Koho, French Anthony R., Sunwoo John B., Ishii Shunsuke, Reimold Andreas M., and Yokoyama Wayne M. "Arrested NaturaKiller CelDevelopment Associated with Transgene Insertion into the Atf2 Locus" Blood, Feb 2006; 107: 1024-1030

附錄：關(guān)于HER2(轉(zhuǎn))

HER2是一種位于乳腺和乳腺癌細(xì)胞表面的受體，能夠控制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，大約20%的乳腺癌病例中HER2基因和/或蛋白水平增加，這些HER2陽(yáng)性的腫瘤是一種高危腫瘤，對(duì)某些常規(guī)的和****反應(yīng)性差，通常預(yù)后不好。為此，多種阻斷HER2的****相繼問(wèn)世，其中目前*為常用并經(jīng)FDA批準(zhǔn)的此類**是（赫賽?。m用于**HER2過(guò)度表達(dá)的乳腺癌。由于這種**只有針對(duì)HER2基因擴(kuò)增和蛋白過(guò)度表達(dá)的病人才有效，因此準(zhǔn)確評(píng)價(jià)HER2基因和蛋白水平是至關(guān)重要的。
FDA已經(jīng)批準(zhǔn)的檢測(cè)方式為**組化（IHC）和熒光原位雜交方法（FISH），顯色原位雜交方法（CISH）也已申報(bào)FDA等待批準(zhǔn)。由于CISH與FISH方法相比具有符合率高、成本低、標(biāo)本可長(zhǎng)期保存等特點(diǎn)，目前被國(guó)內(nèi)外許多檢測(cè)機(jī)構(gòu)采用。作為篩查病人是否使用赫賽汀的手段，上述方法經(jīng)過(guò)國(guó)內(nèi)外臨床的實(shí)踐檢驗(yàn)證明是可行的。但是，還有近1/4的病人由于檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確而接受了不當(dāng)?shù)?*。美國(guó)有一項(xiàng)調(diào)查顯示，IHC檢測(cè)HER2蛋白過(guò)表達(dá)的錯(cuò)誤陽(yáng)性率平均為18%，F(xiàn)ISH檢測(cè)HER2基因擴(kuò)增的錯(cuò)誤率在13%，造成這種情況的原因是多方面的，盡管很多實(shí)驗(yàn)室也在使用FDA批準(zhǔn)的檢測(cè)試劑盒，但是近半數(shù)的實(shí)驗(yàn)室所使用的方法都會(huì)或多或少與FDA批準(zhǔn)的步驟有所不同，比較集中的表現(xiàn)在兩個(gè)環(huán)節(jié)：（1）許多實(shí)驗(yàn)室未使用中性福爾馬林固定，市場(chǎng)上商品化的各種固定劑名目繁多，由于磚利等方面的原因，我們實(shí)際并不知道真實(shí)成分（2）新型自動(dòng)化設(shè)備對(duì)組織進(jìn)行快速處理，其所使用的磚利固定劑和快速的組織處理時(shí)間都和以往有所不同，所以參照FDA認(rèn)可的方法對(duì)現(xiàn)有方法進(jìn)行比對(duì)就變得十分必要?？紤]到**需要昂貴的費(fèi)用和**本身所具有的毒副作用（主要是心臟），美國(guó)臨床腫瘤協(xié)會(huì)（ASCO）和美國(guó)病理家協(xié)會(huì)（CAP）近期聯(lián)合制定了乳腺癌HER2臨床檢測(cè)指南，并發(fā)表在2007年1月的協(xié)會(huì)期刊上，對(duì)HER2檢測(cè)所涉及的有關(guān)問(wèn)題重新進(jìn)行了定義和規(guī)范，其中某些內(nèi)容已被FDA接受并即將實(shí)施。
專家組成員一致強(qiáng)調(diào)的HER2執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)部分如下：
1.檢測(cè)僅應(yīng)該針對(duì)浸潤(rùn)性乳腺癌或乳腺癌的浸潤(rùn)性部分
2.組織處理的條件必須標(biāo)準(zhǔn)化，固定液為10%中性緩沖福爾馬林，固定時(shí)間是6-48小時(shí)，并且上述條件需在病理報(bào)告中標(biāo)注
3.在下列情況下，對(duì)HER2**組化和熒光原位雜交結(jié)果難以作出正確的評(píng)判：
v HER2**組化判定排除標(biāo)準(zhǔn)
（1）組織固定沒(méi)有使用中性緩沖福爾馬林
（2）針吸標(biāo)本在中性緩沖福爾馬林固定液中固定少于1小時(shí)
（3）手術(shù)切除標(biāo)本在中性緩沖福爾馬林固定液中固定少于6小時(shí)或超過(guò)48小時(shí)
（4）具有邊緣收縮或擠壓人工假象的穿刺標(biāo)本
（5）在內(nèi)部正常導(dǎo)管或小葉具有很強(qiáng)的膜染色的組織
（6）對(duì)照組呈現(xiàn)非預(yù)想結(jié)果時(shí)
v HER2熒光原位雜交排除標(biāo)準(zhǔn)
（1）浸潤(rùn)性乳腺癌細(xì)胞數(shù)量少難以在UV光下界定的樣品
（2）沒(méi)有使用中性緩沖福爾馬林固定組織
（3）組織固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（超過(guò)48小時(shí)）
（4）對(duì)照組呈現(xiàn)非預(yù)想結(jié)果
（5）FISH信號(hào)不均一（一致性<75%）
（6）出現(xiàn)背景彌散信號(hào)（>10%信號(hào)位于細(xì)胞漿）
（7）不合適的酶消化（核分辨不清、持續(xù)性自發(fā)熒光）
4.所采用的試驗(yàn)步驟必須經(jīng)過(guò)試驗(yàn)證實(shí)可靠，新試驗(yàn)結(jié)果需和經(jīng)認(rèn)證的可靠的試驗(yàn)結(jié)果符合率在95%以上
5.檢測(cè)步驟必須標(biāo)準(zhǔn)化，任何改動(dòng)必須和原標(biāo)準(zhǔn)化步驟進(jìn)行校正，專家組認(rèn)為自動(dòng)化染色平臺(tái)要優(yōu)于人工操作，后者需要定期進(jìn)行自檢
6.每次試驗(yàn)需設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，對(duì)照可以是細(xì)胞系或已知蛋白和基因表達(dá)情況的腫瘤組織，如果對(duì)照沒(méi)有出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果，則不能對(duì)結(jié)果做出判定
7.應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析有益于結(jié)果的判定，但圖像分析系統(tǒng)需經(jīng)過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化確認(rèn)，結(jié)果仍需病理學(xué)家確認(rèn)
8.HER2各種檢測(cè)結(jié)果的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)必須標(biāo)準(zhǔn)化，依據(jù)*新的臨床結(jié)果和各國(guó)所積累的經(jīng)驗(yàn)，評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)還需要重新定義
v HER2**組化判定標(biāo)準(zhǔn)
（1）檢查對(duì)照標(biāo)本，如果不是預(yù)期結(jié)果，試驗(yàn)需重復(fù)
（2）陽(yáng)性結(jié)果需超過(guò)30%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)完整的細(xì)胞膜染色方可判定
（3）必須可見(jiàn)均一的強(qiáng)細(xì)胞膜完整染色
（4）忽略不完整或淺的細(xì)胞膜染色
（5）對(duì)于弱的細(xì)胞膜染色病例（1-2+）推薦使用定量圖像分析
（6）如果細(xì)胞漿染色遮蓋了細(xì)胞膜染色，需重復(fù)試驗(yàn)或進(jìn)行FISH
（7）如果正常導(dǎo)管或小葉呈現(xiàn)確定的染色，應(yīng)棄去標(biāo)本
（8）如果存在模糊的人工假象，應(yīng)棄去標(biāo)本
（9）避免判定導(dǎo)管內(nèi)癌（DCIS），僅能對(duì)浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌進(jìn)行打分
v HER2熒光原位雜交判定標(biāo)準(zhǔn)
（1）復(fù)習(xí)相應(yīng)的HE和**組化片，以確定浸潤(rùn)性癌細(xì)胞所在的位置，原位癌不應(yīng)加以評(píng)判
（2）檢查對(duì)照標(biāo)本，如果不是預(yù)期結(jié)果，試驗(yàn)需重復(fù)
（3）在兩個(gè)獨(dú)立的浸潤(rùn)癌部分至少檢測(cè)20個(gè)非重疊的細(xì)胞
（4）如果信號(hào)是非均一的（>25%），應(yīng)棄去標(biāo)本
（5）如果自發(fā)熒光很強(qiáng)或細(xì)胞核分辨差，應(yīng)棄去標(biāo)本
（6）如果背景染色影響信號(hào)的評(píng)判（>10%位于細(xì)胞漿）
（7）如果HER2/CEP17比值在1.8~2.2之間，需其他人重復(fù)計(jì)算
（8）如果是非均一性表達(dá)，需其他人重新計(jì)算
（9）可由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的技術(shù)人員計(jì)算結(jié)果，但是需經(jīng)病理醫(yī)生確認(rèn)結(jié)果是否準(zhǔn)確，采樣是否位于浸潤(rùn)性腫瘤細(xì)胞
9.HER2檢測(cè)報(bào)告必須標(biāo)準(zhǔn)化
另外，專家組還對(duì)于開(kāi)展上述檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本檢測(cè)數(shù)量進(jìn)行了規(guī)定，如果每年檢測(cè)數(shù)量很低，那么就不能保證結(jié)果的可靠性。
這份新的HER2檢測(cè)指南一經(jīng)問(wèn)世，就在美國(guó)病理學(xué)界引起了巨大的反響。起草指南的專家組主席Hammond認(rèn)為新指南向病理學(xué)家傳遞了兩方面重要的信息：
1.對(duì)有關(guān)“陽(yáng)性"、“可疑"和“陰性"結(jié)果的定義進(jìn)行了重新修訂，牽涉到IHC和FISH兩種方法，同時(shí)對(duì)兩種方法的判定排除標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了詳盡的說(shuō)明。每一種試驗(yàn)都包括三種結(jié)果，即陽(yáng)性、可疑和陰性。“陽(yáng)性"定義為3+表達(dá)（IHC）和HER2基因/CEP17的比值大于2.2（FISH）“可疑"定義為2+表達(dá)（IHC）和HER2基因/CEP17的比值是1.8-2.2（FISH）“陰性"定義為0或1+表達(dá)（IHC）和HER2基因/CEP17的比值小于1.8-2.2（FISH），如果沒(méi)有17號(hào)染色體作為內(nèi)對(duì)照，上述三種情況所對(duì)應(yīng)的HER2基因拷貝數(shù)分別為>6、4~6和<4。對(duì)于可疑的IHC結(jié)果，必須進(jìn)行基因擴(kuò)增的檢測(cè)對(duì)于可疑的FISH結(jié)果，可以重新計(jì)算切片中其它部位的細(xì)胞擴(kuò)增數(shù)或重新檢測(cè)IHC。對(duì)于三種情況的定義，修改*大的是IHC3+需要大于30%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)的、完整的細(xì)胞膜著色，而不是先前FDA定義的大于10%的腫瘤細(xì)胞（FDA已經(jīng)接受了這種修改）。
2.強(qiáng)調(diào)HER2檢測(cè)質(zhì)量保證體系的必要性并提出相應(yīng)的具體措施。新指南指出現(xiàn)存的HER2檢測(cè)質(zhì)量認(rèn)證體系存在許多問(wèn)題，必須予以強(qiáng)化并提出具體的方法，包括強(qiáng)制相應(yīng)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)參加質(zhì)量評(píng)定工作（目前美國(guó)只有25%~30%的實(shí)驗(yàn)室參加）、使用已知基因擴(kuò)增和蛋白表達(dá)情況的組織芯片（至少包括200例乳腺癌）、*終符合率要達(dá)到90%以上、每年至少檢測(cè)兩次（包括20個(gè)IHC和80個(gè)FISH標(biāo)本）等，如果達(dá)不到要求，可以停止其檢測(cè)資格，當(dāng)然這些措施會(huì)逐步實(shí)施，F(xiàn)DA已經(jīng)同意逐步開(kāi)展這項(xiàng)工作。
PhenoPath Laboratories的**病理學(xué)家Allen M.Gown認(rèn)為新指南邁出了一大步，主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面，一是促使病理學(xué)家和腫瘤學(xué)家相互合作，盡管這種必要性人人皆知，但是新指南為這種合作提供了一種程式化的模式二是指出HER2檢測(cè)的*大影響因素在于試驗(yàn)前期的各項(xiàng)工作，其中*為重要的影響因素是固定，病理學(xué)家今后也需要關(guān)注一下標(biāo)本的固定方式和固定時(shí)間，這不僅僅是為了獲得滿意的HER2檢測(cè)結(jié)果，同時(shí)對(duì)其它病理科所檢測(cè)的各項(xiàng)指標(biāo)都非常有益，比如*常檢測(cè)的ER也會(huì)因?yàn)楣潭ǖ膯?wèn)題（6小時(shí)是所需要的*短的固定時(shí)間）而影響到檢測(cè)結(jié)果。

關(guān)于我們：

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快速、高效、環(huán)保的原位雜交儀 ThermoBrite

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