目錄:上海根生生物科技有限公司>>其它耗材與試劑>> KOD-201KOD -Plus-系列酶高保真性聚合酶 (TOYOBO)KOD-201
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更新時(shí)間:2024-04-16 07:23:00瀏覽次數(shù):25030評(píng)價(jià)
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KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201
特征1. 優(yōu)良的保真性 | |
KOD -Plus-系列的酶具有強(qiáng)力3'→5'核酸外切酶活性(Proof-reading活性),相比KOD DNA polymerase,保真性更高,約為Taq DNA polymerase的80倍。zui適用于克隆。 |
特征2. 通過(guò)熱啟動(dòng)提高了PCR反應(yīng)效率
通過(guò)將2種抗KOD單克隆抗體預(yù)混在酶中,抑制了PCR反應(yīng)前常溫狀態(tài)下的多聚酶活性和
3'→5'核酸外切酶活性(該活性是產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的主要原因)??贵w在PCR的zui初變
性步驟即發(fā)生失活,對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)沒(méi)有任何影響。
特征3. 延伸性?擴(kuò)增效率的提高
對(duì)反應(yīng)Buffer的組成進(jìn)行了*化的重組,使之較以往的KOD DNA polymerase延伸性?擴(kuò)
增效率均有很大的提高。
特征4. 超群的耐熱性
因其耐熱性比Taq DNA Polymerase更為優(yōu)良,故可以將熱變性步驟的溫度設(shè)定值提高,對(duì)
GC-rich等容易形成高級(jí)結(jié)構(gòu)的目的片段尤其適用。
特征5. 高PCR成功率【KOD -Plus- Ver.2】
對(duì)難擴(kuò)增的目的片段、長(zhǎng)目的片段的PCR成功率比KOD -plus-更高。另外,也降低了帶入的
逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液對(duì)PCR反應(yīng)的抑制。
<幾點(diǎn)建議>
●PCR產(chǎn)物的克隆
由于本酶的PCR產(chǎn)物已被平滑化,可用平滑末端克隆法進(jìn)行克隆。此時(shí),如已對(duì)載體進(jìn)行了脫磷酸化處理,就需要對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行磷酸化,或使用帶5'磷酸基的引物?!×硗猓捎诒久傅腜CR產(chǎn)物已被平滑化,不能直接進(jìn)行TA克隆。可使用按以下方法開(kāi)發(fā)的TA克隆試劑盒「TArget Clone -Plus-」。
●PCR條件的設(shè)定
酶的標(biāo)準(zhǔn)使用量為50μl反應(yīng)體系1U。延伸反應(yīng)在68℃條件下進(jìn)行,按1kb目的片段1min.的標(biāo)準(zhǔn)。出現(xiàn)拖尾條帶時(shí),可降低MgSO4濃度,無(wú)法確認(rèn)到擴(kuò)增時(shí),可提高MgSO4濃度。
●GC-rich模板的情況
在反應(yīng)液中添加終濃度為2?5%的DMSO可得到改善。
●以RT反應(yīng)液為模板的情況
過(guò)量帶入RT反應(yīng)液有可能會(huì)對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)生抑制作用。建議帶入到PCR的RT反應(yīng)液在PCR反應(yīng)液的1/25以下(在1/50以下)。這樣就無(wú)需考慮RT反應(yīng)液中Mg2+、dNTPs的影響,只要按照基本反應(yīng)條件添加本酶中添付的dNTPs和MgSO4即可。
品名 | 包裝 | 保存溫度 | Code No. | 價(jià)格 |
KOD -Plus- | 200U×1 | -20℃ | KOD-201 | RMB 800 |
(200U×1)×5 | -20℃ | KOD-201B | RMB 3700 | |
KOD -Plus- Ver.2 | 200U×1 | -20℃ | KOD-211 | RMB 1000 |
(200U×1)×5 | -20℃ | KOD-211B | RMB 4600 |
相關(guān)產(chǎn)品價(jià)格表
品名 | 包裝 | 保存溫度 | Code No. | 價(jià)格 |
定點(diǎn)突變導(dǎo)入試劑盒 | 20次 | -20℃ | SMK-101 | RMB 1500 |
KOD用TA克隆試劑盒 | 10次 | -20℃ | TAK-201 | RMB 380 |
KOD -Plus-用Buffer | 1ml | -20℃ | KOD-2B | RMB 50 |
KOD -Plus-用MgSO4 | 1ml | -20℃ | KOD-2S | RMB 50 |
KOD -Plus- Ver.2用Buffer | 1ml | -20℃ | KOD-3B | RMB 50 |
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)