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蘇州艾瑞德生物科技有限公司
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號CFC019D
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地蘇州市
聯(lián)系方式:盛經(jīng)理查看聯(lián)系方式
更新時間:2015-05-31 00:29:38瀏覽次數(shù):86次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線歡迎訪問公司:http://www.ardbio.cn 蘇州艾瑞德生物科技有限公司是一家*的生物科研產(chǎn)品與合同供應(yīng)商,是國內(nèi)專注于食品安全檢測、動物疫病檢測以及相關(guān)領(lǐng)域的高科技生產(chǎn)型企業(yè)。*以來,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定*,并與國內(nèi)的檢驗檢疫管理部門及*科研院所等機構(gòu)密切合作,研究開發(fā)*的檢測技術(shù)及產(chǎn)品。可面對大型檢驗檢測機構(gòu)和企業(yè)自有實驗室提供全系列產(chǎn)品和有效的。
1. 原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的隱性孔雀石綠隱性結(jié)晶紫和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭孔隱性雀石綠抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物隱性孔雀石綠隱性結(jié)晶紫的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)隱性孔雀石綠隱性結(jié)晶紫的含量。
2. 試劑盒組成
(1) 96孔酶標(biāo)板:1塊。
(2) 標(biāo)準(zhǔn)品液:(1.0ml/瓶)0ppb、0.1ppb、0.4ppb、1.6ppb、6.4ppb、25.6ppb。
(3) 酶標(biāo)記物: 1瓶(12ml)。
(4) 抗體工作液: 1瓶(7ml)。
(5) 底物緩沖液: 1瓶(7ml)。
(6) 底物液: 1瓶(7ml)。
(7) 終止液: 1瓶(7ml)。
(8) 20倍濃縮洗液:(50ml)加蒸餾水稀釋到1000ml。
(9) 提取液A
(10) 提取液B
3. 需要但試劑盒中不提供的器材和試劑
(1)設(shè)備
…微孔板酶標(biāo)儀(450nm)
…均質(zhì)器
…振蕩器
…離心機
…各種量程的微量移液器
(2)試劑
…蒸餾水
…環(huán)已烷
4. 注意事項
(1)終止液為2M ,避免接觸皮膚。
(2)不要使用已過有效日期的隱性孔雀石綠檢測試劑盒;不同批次、不同試劑盒之間的試劑等內(nèi)容不可混用,以免降低靈敏度。
(3)0標(biāo)準(zhǔn)液的A450nm<0.6時,表示試劑可能變質(zhì),請勿使用。
(4)顯色劑變藍(lán),表明已變質(zhì),請勿使用。
5. 儲存條件
(1) 2-8℃保存,切勿冷凍。
(2) 將不用的酶標(biāo)板放進(jìn)原袋中重新密封。
(3) 酶標(biāo)記物和顯色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
6. 樣品處理
(1) 魚/蝦樣品的準(zhǔn)備(稀釋倍數(shù)2)
A)魚蝦去皮取肉,用勻漿器均質(zhì)樣品;
B)稱取1.0g均質(zhì)好的樣品,放入15mL離心管中,加入0.5mL的提取液A,再加入1.5mL的提取液B,渦旋5-10分鐘;
C)3000rpm離心5分鐘,取上清,
D)取上清50μl進(jìn)行實驗。
(2) 水質(zhì)樣品(稀釋倍數(shù)1)
離心后取50µl作ELISA分析。
7. 免疫分析時試劑的準(zhǔn)備
(1) 注意事項
a) 使用之前將所有試劑平衡至室溫。
b) 使用之后立即將所有試劑放回2-8℃。
c) 在使用中不要讓微孔干燥。
d) EIA分析的重復(fù)性,很大程度上取決于洗板的*性,仔細(xì)按照*的洗板順序操作是EIA測定程序中的要點。
e) 在所有恒溫孵育過程中,避免光線照射,用蓋板膜蓋住微孔板。
(2)濃縮洗滌液使用前應(yīng)根據(jù)所需量進(jìn)行20倍稀釋,即按1ml濃縮洗滌液加入19ml蒸餾水的比例進(jìn)行稀釋。
8. 測定程序
(1) 將標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所需微量反應(yīng)板(均需2個平行試驗)放在反應(yīng)架上。
(2) 加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)液或處理好的樣品到各自的微孔板中。
(3) 加入50μl已稀釋的抗體應(yīng)用液加入微量反應(yīng)板,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后,室溫下反應(yīng)30分鐘。
(4) 棄去孔中液體,并將微孔板剩余殘液在吸水紙上拍干。每孔注滿稀釋好的洗液,輕輕振蕩,放置2分鐘,棄去孔中液體,并在吸水紙上拍干,重復(fù)5次。
(5) 加入100μl酶標(biāo)記物應(yīng)用液到微孔板中,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后, 室溫下反應(yīng)20分鐘。
(6) 棄去孔中的液體,并在吸水紙上拍干,每孔注滿稀釋好的洗液,輕輕振蕩,放置2分鐘,棄去孔中液體,并在吸水紙上拍干,重復(fù)5次。
(7) 加底物緩沖液50μl,再加入底物液50μl,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后,在室溫避光處孵育10分鐘。
(8) 加入50μl終止液到微孔板中,混合好在450nm處測量吸光度值,在加入停止液后10分鐘內(nèi)讀取光度值。
10. 結(jié)果
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以隱性孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/mL)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中隱性孔雀石綠實際濃度。
11. 測定技術(shù)指標(biāo)
(1) 靈敏度:
隱性孔雀石綠檢測試劑盒的平均檢測下限約為0.1ng/g(0.1ppb)。
(2) 準(zhǔn)確度(回收率):
回收率為90%±15%。
12. 交叉反應(yīng)活性
隱性孔雀石綠檢測試劑盒能檢測隱性孔雀石綠及其相似物,它們的結(jié)合程度不同。以下表格中展示的是相關(guān)值及交叉反映率(%CR),所有濃度均為ppb級。
種類 % CR
隱性孔雀石綠 *
孔雀石綠 <10%
隱性 *
結(jié)晶紫 <10%
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