歡迎訪問公司：http://www.ardbio.cn 蘇州艾瑞德生物科技有限公司是一家*的生物科研產(chǎn)品與合同供應(yīng)商，是國(guó)內(nèi)專注于食品安全檢測(cè)、動(dòng)物疫病檢測(cè)以及相關(guān)領(lǐng)域的高科技生產(chǎn)型企業(yè)。*以來，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定*，并與國(guó)內(nèi)的檢驗(yàn)檢疫管理部門及*科研院所等機(jī)構(gòu)密切合作，研究開發(fā)*的檢測(cè)技術(shù)及產(chǎn)品?？擅鎸?duì)大型檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)和企業(yè)自有實(shí)驗(yàn)室提供全系列產(chǎn)品和有效的。

詳細(xì)介紹

一、原理
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的蘇丹紅和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)蘇丹紅抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物蘇丹紅的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)蘇丹紅的含量。

二、試劑盒技術(shù)指標(biāo)
試劑盒靈敏度：         0.4ppb
樣本定量檢測(cè)下限
水基質(zhì)(番茄醬、壇壇鄉(xiāng))   0.4ppb
油基質(zhì)(辣椒油，辣椒醬)   0.4ppb
粉末狀(辣椒粉)          1.0ppb
交叉反應(yīng)率
蘇丹1號(hào) ……………………………………………… *
蘇丹2號(hào) ……………………………………………… ＜1%
蘇丹4號(hào) ……………………………………………… ＜1%
對(duì)位紅 ………………………………………………… 120%
樣本回收率
水基質(zhì) ……………………………………………… 75±10%
油基質(zhì) ……………………………………………… 50±10%
粉末狀 ……………………………………………… 65±10%

三、試劑盒組成
1、微量測(cè)試孔：96T
2、標(biāo)準(zhǔn)品液：(1ml/瓶) 0ppb、0.4ppb、3.2ppb、6.4ppb、12.8ppb、25.6ppb
3、酶標(biāo)記物          12ml
4、抗體工作液        7ml
5、底物緩沖液破      7ml
6、底物液            7ml
7、終止液            7ml
8、 20倍濃縮洗滌液   50ml
9、1mg/ml標(biāo)準(zhǔn)品液：(0.2ml)

四、樣本處理
取1g樣品(辣椒面、辣椒油、辣椒醬、番茄醬)，加入3 mL丙酮溶液，超聲震蕩20 min，渦旋混合0.5 min，靜置10 min， 3000 r/min離心分離10 min，取上清100 μL用PBST稀釋10倍至1 mL，取50 μL進(jìn)行ELISA測(cè)定。

五、操作步驟
1. 將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫(20～26℃)下平衡30min以上，將需用的條板固定于支架，按順序編號(hào)；
2. 洗液配制：將50 mL濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水稀釋至1000 mL備用。(或按需量稀釋)
3. 標(biāo)準(zhǔn)品的配制：先將試劑盒中的1 mg/mL蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)品用洗液稀釋1000倍，變成1000 ng/mL，再用洗液將1000 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)品分別稀釋成0.4 ng/mL， 3.2 ng/mL，6.4 ng/mL，12.8 ng/mL，25.6 ng/mL。(現(xiàn)配現(xiàn)用)
4. 在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)品，樣品孔加入50 μL待測(cè)樣品，然后每孔加入50 μL抗體(加入標(biāo)品和樣品時(shí)無時(shí)間差的影響)，輕拍混勻，37℃下孵育30min；
5. 倒出孔中的液體，以試劑盒濃縮洗液稀釋20倍后作為洗液，用洗板機(jī)洗滌4～6遍；沒有洗板機(jī)的用戶可用300 μL洗液充入各孔中，靜置20 s，倒出孔中的液體，將微孔架倒置，在吸水紙上連續(xù)拍打3次以上，以保證*除去孔中的液體，重復(fù)操作4～6遍；
6. 每孔加入酶標(biāo)記物100 μL，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃ 環(huán)境中反應(yīng)20 min ，取出重復(fù)洗板步驟。
7. 顯色：每孔加入底物緩沖液50 μL，再加底物液50 μL．輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后，置37℃ 環(huán)境中反應(yīng)10 min。
8. 測(cè)定：每孔加入終止液50 μL，輕輕振蕩混勻．設(shè)定酶標(biāo)儀于450 nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630 nm 檢測(cè)，在20 min內(nèi)讀完數(shù)據(jù))，測(cè)定每孔OD 值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。

標(biāo)準(zhǔn)樣品配制方法：
(1)準(zhǔn)備5個(gè)1 mL瓶子，其中一個(gè)加入1000 μL洗液，一個(gè)加入700 μL洗液，其余的分別加入500 μL洗液。
(2)在1000 μL洗液瓶子中先吸出25.6 μL的洗液，然后加入25.6 μL的1000 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品，混勻，使其濃度為25.6 ng/mL，作好記號(hào)；
(3)再?gòu)?5.6 ng/mL的瓶子中吸出500 μL加入其中一個(gè)500 μL洗液的瓶子中，使其濃度為12.8 ng/mL，混勻，作好記號(hào)；
(4)再?gòu)?2.8 ng/mL的瓶子中吸出500 μL加入其中一個(gè)500 μL洗液的瓶子中，使其濃度為6.4 ng/mL，混勻，作好記號(hào)；
(5)再?gòu)?.4 ng/mL的瓶子中吸出500 μL加入其中一個(gè)500 μL洗液的瓶子中，使其濃度為3.2 ng/mL，混勻，作好記號(hào)；
(6)再?gòu)?.2 ng/mL的瓶子中吸出100 μL加入其中一個(gè)700 μL洗液的瓶子中，使其濃度為0.4 ng/mL，混勻，作好記號(hào)。 (加樣前應(yīng)將標(biāo)準(zhǔn)品充分混勻，配好后在半小時(shí)內(nèi)使用)

七、結(jié)果判定
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中蘇丹紅實(shí)際濃度。

八、注意事項(xiàng)
1．室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20-25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2．洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3．混合要均勻，洗板要*，否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
4．反應(yīng)終止液為2M ，避免接觸皮膚。
5．將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封; 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
6．不要使用過了有效日期的試劑盒，不要使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
7．顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之，0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.6時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
8．該試劑盒*反應(yīng)溫度為25 ℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

九、儲(chǔ)藏條件和保質(zhì)期
儲(chǔ)藏條件：試劑盒于2-8℃保存，不要冷凍。
保質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見包裝盒。

關(guān)鍵詞：洗板機(jī) 酶標(biāo)儀

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，環(huán)保在線對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

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