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三聚氰胺ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號CFC013D

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更新時間：2018-03-03 10:35:01瀏覽次數(shù)：277次

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：66條

所在地區(qū)：江蘇蘇州市

聯(lián)系人：盛經(jīng)理（主管）

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產(chǎn)品簡介

歡迎訪問公司：http://www.ardbio.cn 蘇州艾瑞德生物科技有限公司是一家*的生物科研產(chǎn)品與合同供應(yīng)商，是國內(nèi)專注于食品安全檢測、動物疫病檢測以及相關(guān)領(lǐng)域的高科技生產(chǎn)型企業(yè)。*以來，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定*，并與國內(nèi)的檢驗檢疫管理部門及*科研院所等機(jī)構(gòu)密切合作，研究開發(fā)*的檢測技術(shù)及產(chǎn)品?？擅鎸Υ笮蜋z驗檢測機(jī)構(gòu)和企業(yè)自有實驗室提供全系列產(chǎn)品和有效的。

詳細(xì)介紹

一、原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的三聚氰胺和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭三聚氰胺抗體，加入酶標(biāo)記物后，用底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物三聚氰胺的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)三聚氰胺的含量。

二、試劑盒檢測限
試劑盒檢測限：         10 ng/mL

三、試劑盒組成
1．預(yù)包被板：96T
2．標(biāo)準(zhǔn)品液：(1mL/瓶) 0 ng/mL、20 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL
3．酶標(biāo)記物          12 mL
4．抗體工作液         7 mL
5．底物緩沖液         7 mL
6．底物液             7 mL
7．終止液             7 mL
8．20倍濃縮洗滌液    50 mL

四、樣本處理
配制樣品稀釋液：
稱取89.5 g Na2HPO4·12H2O ，蒸餾水定容至1000 mL。

濕的寵物食品萃取方法(稀釋100倍)
1．勻質(zhì)樣品到布丁狀；
2．稱取2 g樣品加入10 mL 60%甲醇水溶液，并劇烈振蕩；
3．超聲萃取1 min，漩渦混合1 min，然后靜止5 min，使樣品分層；
4．5000 r/min室溫離心5 min，用玻璃纖維濾紙過濾上清液，并將其收集于干凈試管中；
5．用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋；
6．取50 μL進(jìn)行實驗。

干的寵物食品萃取方法(稀釋200倍)
1．均質(zhì)干的寵物飼料樣品；
2．稱取1 g樣品加入10 mL 60%甲醇水溶液，并劇烈振蕩；
3．超聲萃取1 min，漩渦混合1 min，然后靜止5 min，使樣品分層；
4．5000 r/min室溫離心5 min，用玻璃纖維濾紙過濾上清液，并將萃取液收集于干凈試管中；
6．用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋；
7．取50 μL進(jìn)行實驗。

液態(tài)奶/乳飲料(稀釋5倍)
1．準(zhǔn)確吸取1 mL液態(tài)奶或乳飲料于干凈離心管中，冷藏至4℃?zhèn)溆茫?br />2．將1 mL液態(tài)奶或乳飲料樣品置于離心機(jī)中，5000 g離心10 min(建議10℃低溫離心)，分離樣品中脂肪；
3．棄上層脂肪，取0.2 mL離心后的脫脂液態(tài)奶或乳飲料試樣于干凈試管中；
4．加入0.8 mL樣品稀釋液于離心后的脫脂液態(tài)奶或乳飲料中，振蕩混勻樣品，取50 μL進(jìn)行實驗。
奶粉(稀釋25倍)
1．稱取1 g奶粉樣品于干凈試管中；
2．加入5 mL的45～50℃溫水溶解奶粉并混勻后冷藏至4℃?zhèn)溆茫?br />3．取1 mL溶解好的奶粉試樣于離心管中，5000 g離心10 min(建議10℃低溫離心)，棄上層脂肪，取0.2 mL試樣于干凈試管中；
4．加入0.8 mL樣品稀釋液于試管中，振蕩混勻取50 μL進(jìn)行實驗。
酸奶：(稀釋5倍)
1．準(zhǔn)確吸取1 mL液態(tài)奶或乳飲料于干凈離心管中，將PH值調(diào)至6～8，冷藏至4℃?zhèn)溆茫?br />2．將1 mL樣品置于離心機(jī)中，5000 g離心10 min(建議10℃低溫離心)，棄上層脂肪，取0.2 mL試樣于干凈試管中；
3．加入0.8 mL樣品稀釋液于試管中，振蕩混勻取50 μL進(jìn)行實驗。
初乳樣品：(稀釋1倍)
直接法：將樣品4℃冷藏30 min后，4000 r/min離心15 min，棄去上層脂肪，取50 μL進(jìn)行實驗。

五、操作步驟
1．將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫(20～26℃)下平衡30min以上，將需用的板條放入支架，按順序編號；
2．洗液配制：將50 mL濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水稀釋至1000 mL備用(或按需量稀釋)；
3．在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)品，樣品孔加入50 μL待測樣品，然后每孔加入50 μL抗體(加入標(biāo)品和樣品時無時間差的影響)，輕拍混勻，37℃下孵育40 min；
4．倒出孔中的液體，用洗板機(jī)洗滌4～6遍；沒有洗板機(jī)的用戶可用300 μL洗液充入各孔中，靜置20 s，倒出孔中的液體，將微孔架倒置，在吸水紙上連續(xù)拍打3次以上，以保證*除去孔中的液體，重復(fù)操作4～6遍；
5．加入酶標(biāo)記物100 μL，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃ 環(huán)境中反應(yīng)20 min，取出重復(fù)洗板步驟；
6．顯色：每孔加入底物緩沖液50 μL，再加底物液50 μL，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后，置37℃ 環(huán)境中反應(yīng)10 min；
7．測定：每孔加入終止液50 μL，輕輕振蕩混勻．設(shè)定酶標(biāo)儀于450 nm處，測定每孔OD 值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品濃度。

六、結(jié)果判定
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/mL)的半對數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度，乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中三聚氰胺實際濃度。

七、注意事項
1．試劑及樣本沒有回到室溫(20～26℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低；
2．洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作；
3．混合要均勻，洗板要*，否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象；
4．反應(yīng)終止液為2 mol/L ，避免接觸皮膚。
5．將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下；
6．不要使用過了有效日期的試劑盒，不要使用不同批號試劑盒中的試劑；
7．顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之，0濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值小于0.6時，表示試劑可能變質(zhì)；
8．該試劑盒*反應(yīng)溫度為37 ℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

八、儲藏條件和保質(zhì)期
儲藏條件：試劑盒于2～8℃保存，不要冷凍。
保質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見包裝盒。