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去氫表雄酮ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)CFC012D

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更新時(shí)間：2018-02-27 09:32:45瀏覽次數(shù)：344次

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其他類(lèi)檢測(cè)試劑盒

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司

經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：66條

所在地區(qū)：江蘇蘇州市

聯(lián)系人：盛經(jīng)理（主管）

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

歡迎訪問(wèn)公司：http://www.ardbio.cn 蘇州艾瑞德生物科技有限公司是一家*的生物科研產(chǎn)品與合同供應(yīng)商，是國(guó)內(nèi)專(zhuān)注于食品安全檢測(cè)、動(dòng)物疫病檢測(cè)以及相關(guān)領(lǐng)域的高科技生產(chǎn)型企業(yè)。*以來(lái)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定*，并與國(guó)內(nèi)的檢驗(yàn)檢疫管理部門(mén)及*科研院所等機(jī)構(gòu)密切合作，研究開(kāi)發(fā)*的檢測(cè)技術(shù)及產(chǎn)品。可面對(duì)大型檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)和企業(yè)自有實(shí)驗(yàn)室提供全系列產(chǎn)品和有效的。

詳細(xì)介紹

預(yù)期應(yīng)用
去氫表雄酮(dehydroepiandrosterone, DHEA), 化學(xué)名為3β-羥基雄甾-5烯-17酮,是人體腎上腺與性腺分泌的一種C19類(lèi)固醇素,具有雄性激素作用,可提高體內(nèi)的睪酮水平，近年來(lái)因發(fā)現(xiàn)其具有促進(jìn)肝糖氧化、減少糖原異生和抑制腫瘤的作用，因此被添加到減肥類(lèi)保健食品中。目前，去氫表雄酮和其他內(nèi)源性類(lèi)固醇激素的濫用已成為一個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題，目前已有含DHEA的保健食品出現(xiàn), 因此本試劑盒用于檢測(cè)減肥類(lèi)保健食品中的去氫表雄酮。

實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒為一種直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA試劑盒。在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原；加入樣品或標(biāo)準(zhǔn)品，樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的去氫表雄酮與微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)記的去氫表雄酮多克隆抗體，游離的酶標(biāo)記抗體通過(guò)洗滌被出去；再加入顯色液，結(jié)合的酶標(biāo)記抗體是無(wú)色的顯色液轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，加入反應(yīng)終止液后再轉(zhuǎn)化為黃鱔，在450nm處測(cè)量，樣品吸光值與樣品中的去氫表雄酮含量成負(fù)相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣品中去氫表雄酮含量。

試劑盒技術(shù)指標(biāo)
檢測(cè)限： 0.1ppb
檢測(cè)范圍：0.1 ppb – 62.5ppb

交叉反應(yīng)：
Androsterone(雄甾酮)         0.1%
Androstenedione(雄烯二酮)       0.25%
Etiocholanolone(本膽烷醇酮)   0.1%
Testosterone(睪丸酮)          0.01%
Cortisol(*)              0.01%
Progesterone(孕酮)            0.25%
Estradiol(雌二醇)             0.01%

試劑盒組成及試劑配制
1.         酶標(biāo)板：96T/8孔
2.         標(biāo)準(zhǔn)品溶液：0ppb,0.1ppb,0.5ppb,2.5ppb,12.5ppb,62.5ppb(1ml/瓶)
3.         酶標(biāo)記物液：    7ml/瓶。
4.         底物緩沖液：    7ml/瓶。
5.         底物液：        7ml/瓶。
6.         終止液：        7ml/瓶
7.         20倍濃洗滌液： 50ml/瓶。

樣品前處理方法：

1. 膠囊類(lèi)樣品：取片劑或膠囊試樣進(jìn)行粉碎混勻，稱(chēng)取0.1000g試劑(準(zhǔn)確至0.001g)于離心管中，加入1ml甲醇使用超聲提取5min后以3000r/min離心3min。準(zhǔn)確取0.1ml試樣定容至1ml，檢測(cè)時(shí)加入50微升進(jìn)行檢測(cè)。
2. 茶葉樣品：用研缽研碎茶葉樣品，稱(chēng)取1g研碎的樣品，加入1ml甲醇，漩渦混勻5min后，放振蕩器上震蕩15min；3000r/min離心3min，轉(zhuǎn)移出上清，取0.1ml定容至1ml。取50μL進(jìn)行分析。
3.血清樣品：將血清3000r/min離心3min，取上清50μL進(jìn)行分析。

操作步驟
1. 加試劑盒從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫下平衡30min以上。
2. 加樣：加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或50μL待測(cè)樣品，然后每孔加入50μL酶標(biāo)記物，輕輕混勻，室溫下孵育30 min。
3 洗板4-5次，每次浸泡30秒，拍干。。
4         顯色：每孔加入底物緩沖液50µl，再加底物液50µl，輕輕振蕩混勻，25℃環(huán)境避光顯色10min。。
5．測(cè)定：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，在20min內(nèi)讀完數(shù)據(jù))，測(cè)定吸光度值。

結(jié)果判定
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo))，OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo))，在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)
1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫(20-25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、混合要均勻，洗板要*，否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
4、反應(yīng)終止液為2M ，避免接觸皮膚。
5、將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封; 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
6、不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒，不要使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
7、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之，0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.6時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。

儲(chǔ)藏條件和保質(zhì)期
儲(chǔ)藏條件：試劑盒于2-8℃保存，不要冷凍。
保質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒