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行業(yè)產(chǎn)品

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司


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*ELISA試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號CFC005D

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地蘇州市

聯(lián)系方式:盛經(jīng)理查看聯(lián)系方式

更新時間:2018-03-04 17:45:26瀏覽次數(shù):299次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:66條

所在地區(qū):江蘇蘇州市

聯(lián)系人:盛經(jīng)理 (主管)

產(chǎn)品簡介

歡迎訪問公司:http://www.ardbio.cn 蘇州艾瑞德生物科技有限公司是一家*的生物科研產(chǎn)品與合同供應(yīng)商,是國內(nèi)專注于食品安全檢測、動物疫病檢測以及相關(guān)領(lǐng)域的高科技生產(chǎn)型企業(yè)。*以來,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定*,并與國內(nèi)的檢驗檢疫管理部門及*科研院所等機(jī)構(gòu)密切合作,研究開發(fā)*的檢測技術(shù)及產(chǎn)品??擅鎸Υ笮蜋z驗檢測機(jī)構(gòu)和企業(yè)自有實驗室提供全系列產(chǎn)品和有效的。

詳細(xì)介紹

一、 原理 
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測水產(chǎn)和雞肉等組織樣本中的AHD,在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原,利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的原理來進(jìn)行的,樣本中的AHD和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗*代謝物的衍生物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣品中的AHD含量與樣品的吸光度值呈反比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出*代謝物含量。
 
二、 試劑盒技術(shù)指標(biāo):
試劑盒靈敏度:          0.1 ppb
樣本檢測下限:
組織、蜂蜜              0.2 ppb
魚/蝦等水產(chǎn)品組織因存在一定的干擾,檢測下限為0.3 ppb
回收率:
魚/蝦水產(chǎn)組織               90%±15%
蜂蜜/雞肉/肝臟樣本           80%±15%
交叉反應(yīng)率:
*代謝物             *
*代謝物            ﹤0.1%
呋喃它酮代謝物            ﹤0.1%
*代謝物            ﹤0.1%
 
三、試劑盒組成
1.微量測試孔:96T/8孔
2.標(biāo)準(zhǔn)品液: 0 ppb、0.1 ppb、0.3 ppb、0.9 ppb、2.7 ppb、8.1 ppb(1.0 ml/瓶)
3.酶標(biāo)記物            12 mL
4.抗體工作液           7 mL
5.底物緩沖液           7 mL
6.底物液               7 mL
7.終止液               7 mL
8.20倍濃縮洗滌液      50 mL
9.復(fù)溶液               50 mL
10.15.1 mg衍生化試劑
 
四、 所用儀器、試劑
儀器:微孔酶標(biāo)儀、振蕩器、離心機(jī)、天平(感量0.01 g) 各種量程微量移液器
試劑:甲醇、氫氧化鈉、乙酸乙酯、正己烷、濃HCl、*、鄰硝基苯甲醛、亞硝基鐵  (K2Fe(CN)5·NO·3H2O)、ZnSO4·7H2O
 
五、樣本前處理步驟
樣本處理前須知
處理任何樣本時,都必須注意:
1、實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
2、實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時可對實驗器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
樣本前處理需配制:
1、衍生化試劑 稱15.1 mg鄰硝基苯甲醛加甲醇10 mL溶解(濃度10 mM)
2、C液:(供奶樣用)稱12.5 g 亞硝基鐵  用去離子水定溶至100 mL。
3、D液:(供奶樣用)稱29.8 g   鋅用去離子水溶解定溶至100 mL。
4、0.1 MK2HPO4 稱22.8 g K2HPO4·3H2O加去離子水溶解定溶至1000 mL
5、1 M HCl  取8.6 mL濃HCl加水定溶至100 mL。
6、1 M NaOH 稱取4 g NaOH加水定溶至100 mL。
樣本的處理
(a)魚蝦和肉樣
用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,接(d)的描述方法。
(b)奶樣
1、取出5 mL的樣本到玻璃離心管中,分別加入C液和D液各250 µL;
2.、用振蕩器充分混合樣本,用恒溫離心機(jī)4000 r/min以上離心10 min,4-12 ℃。如果沒有恒溫離心機(jī),則先將樣本降溫至大約8 ℃,然后離心;
3、接(d)的描述方法
(c)蜂蜜
1、取1 g樣本到離心管中;
2、加入4 mL的蒸餾水振蕩溶解,0.5 mL 1 M HCL和100 µL衍生化試劑,充分振蕩;
3、接(d)第2步描述方法。
(d)接上面的方法
1、 取1±0.05 g的均質(zhì)物(魚蝦/肉樣)、牛奶的離心上清液1.1 mL(相當(dāng)于1 mL的奶樣),分別加入4 mL的蒸餾水,0.5 mL 1 M HCL和100 µL衍生化試劑,充分振蕩;
2.、在56 ℃過夜孵育(2 h);
3、 分別加入5 mL 0.1 M K2HPO4 ,0.4 mL 1 M NaOH和5 mL的乙酸乙酯,劇烈振蕩30 s;
4、 在室溫下(20-25 ℃)4000 r/min以上離心10 min;
5、 取出2.5 mL的乙酸乙酯到另一個容器中于50 ℃氮氣/空氣吹干。
6、 用1 mL正己烷溶解干燥物,用1 mL已稀釋好的復(fù)溶液充分混合;在室溫下   (20-25 ℃)4000 r/min以上離心10 min;
7、 取50 µL下層用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):2
 
六、操作步驟
1、 將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出并將所需試劑從試劑盒取出,置室溫(20-25 ℃)平衡30 min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、 按需要取出微孔條及板架,將不用的微孔板重新密封,保存于2-8 ℃,不要冷凍。
3、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50 µL /孔,然后加入抗體工作液50 µL/孔,再振蕩混勻,用封板膜蓋板,室溫反應(yīng)30 min。
4、 洗板4-5次,每次浸泡30 s,拍干。
5、 加入酶標(biāo)記物100 µL /孔,用封板膜蓋板,室溫反應(yīng)20 min。
6、 洗板4-5次,每次浸泡30 s,拍干。
7、 顯色:每孔加入底物緩沖液50 µL,再加底物液50 µL,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境避光顯色10 min。
8. 測定:每孔加入終止液50 µL,輕輕振蕩勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450 nm處(在20 min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定吸光度值。
 
 
七、結(jié)果判定
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以AHD標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中AHD實際濃度。
 
八、注意事項
1、室溫低于20 ℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20-25 ℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、混合要均勻,洗板要*,否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
4、反應(yīng)終止液為2 M  ,避免接觸皮膚。
5、將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封; 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
6、不要使用過了有效日期的試劑盒,不要使用不同批號試劑盒中的試劑。
7、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之,0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.6時,表示試劑可能變質(zhì)。
 
九、儲藏條件和保質(zhì)期
儲藏條件:試劑盒于2-8 ℃保存,不要冷凍。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒


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