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*快速檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)CFC036D

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更新時(shí)間：2016-04-02 20:08:11瀏覽次數(shù)：469次

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司

經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

*是一種廣譜抗生素，具有很好的抗菌效果，常用于畜牧業(yè)生產(chǎn)中，然而，*會(huì)造成人的再生障礙性貧血，而且誘發(fā)濃度還沒(méi)有確定，所以目前已經(jīng)禁止在動(dòng)物及食品中使用*。*快速檢測(cè)試劑盒具有方便、快速、靈敏等特點(diǎn)，適用于大批量樣品快速檢測(cè)。

詳細(xì)介紹

【測(cè)定原理】

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物*和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗*抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物*的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)殘留物*的含量。
【試劑盒技術(shù)指標(biāo)】
規(guī)      格：96孔/盒
靈敏度： 0.05ppb
檢測(cè)時(shí)間： 75min
樣本定量檢測(cè)下限：
腸   衣………………………………………………0.1ppb
蜂   蜜………………………………………………0.1ppb
牛   奶………………………………………………0.05ppb
尿液、血清…………………………………………0.1ppb
組織、肝臟……………………………………… 0.025ppb
飼   料………………………………………………0.15ppb
樣本回收率：
組織、肝臟………………………………………80%±10%
蜂蜜、腸衣………………………………………70%±10%
牛奶、飼料………………………………………85%±15%
尿液、血清………………………………………70%±10%　
交叉反應(yīng)率
*……………………………………………… *
*…………………………………………… < 0.1%
氟*…………………………………………< 0.1%
【試劑盒組成】
1、微量測(cè)試孔：1×96孔板（12條×8孔）
2、標(biāo)準(zhǔn)液X6瓶：（1ml/瓶） 0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb
3、酶標(biāo)記物       12ml……………………紅色帽
4、抗體工作液   7ml……………………   綠色帽
5、底物 A 液      7ml…………………… 白色帽
6、底物 B 液      7 ml…………………… 黑色帽
7、終止液        7 ml…………………… 黃色帽
8、 20X濃縮洗滌液   40ml………………透明帽
9、 2X濃縮復(fù)溶液     50ml………………透明帽

【酶標(biāo)免疫分析程序】
　測(cè)定前應(yīng)須知：
1、使用之前將所有試劑和需用板條的溫度回升至室溫（20-25℃）。
2、使用之后立即將所有試劑放回2-8℃。
3、在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的*性，正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。
4、在所有恒溫孵育過(guò)程中，避免光線照射，用蓋板膜封住微孔板。
操作步驟
1、從4℃冷藏環(huán)境中取出所需試劑，置室溫（20-25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔及框架，將不用的微孔放入自封袋，保存于2-8℃。
3、配液：將40ml濃縮洗滌液（20倍濃縮）用去離子水按照1：19稀釋（1份濃縮洗滌液+19份去離子水），或按所需用量配制洗滌液。
4、編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本 50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗體50µl/孔，用蓋板膜封板，輕輕震蕩混勻。25℃環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、取出將孔內(nèi)液體甩干，用洗液250µl/孔洗板4-5次，每次間隔15-30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
7、每孔加入酶標(biāo)記物100µl，蓋板膜蓋板后置25℃環(huán)境中反應(yīng)30min。將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液充分洗，4-5遍（同上），用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
8、顯色：每孔加入底物A液50µl，再加底物B液50µl，輕輕振蕩混勻，25℃環(huán)境中避光顯色15min。
9、測(cè)定：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定每孔OD值。
【結(jié)果判定】
結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法，定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與其所含*成反比。
1、粗略判定：
用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍（ppb）。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.250，樣本2的吸光度值為0.720，標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是：0ppb為1.610；0.05ppb為1.380；0.15ppb為1.100；0.45ppb為0.620；1.35ppb為0.289；4.05ppb為0.108。則樣本1的濃度范圍是1.35ppb-4.05ppb；樣本2的濃度范圍是0.15 ppb-0.45 ppb。乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中*實(shí)際濃度。
2、定量分析：
（1）百分吸光率的計(jì)算，標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)（0標(biāo)準(zhǔn)）的吸光度值，再乘以*，即
百分吸光度值（%）＝ B ×*

B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以*標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中*實(shí)際濃度。若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。（索?。?/span>
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線：
B/B0 （%）

     0.05       0.15        0.45      1.35        4.05
                    CAP（ppb） [µg/kg]
        圖1： *檢測(cè)試劑盒的回歸曲線
4、再現(xiàn)性：
%CV

                     CAP （ppb） [µg/kg]
           圖2：*檢測(cè)試劑盒的精密度
由多個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定了精密度，圖2顯示出*檢測(cè)試劑盒的精密度情況，獲得的標(biāo)準(zhǔn)吸收值的變異系數(shù)（%CV）對(duì)相應(yīng)*濃度作曲線，可以看到在全部范圍內(nèi)變異系數(shù)如此之低，可以得到很好的再現(xiàn)性。
【注意事項(xiàng)】
1、使用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。試劑及標(biāo)本沒(méi)有回到室溫（20-25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)伴隨著出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、混合要均勻，否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
4、反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
5、不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒，稀釋或攙雜使用會(huì)引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號(hào)的盒中試劑。
6、不用的微孔板放進(jìn)自封袋密封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位（A450nm<0.5 ）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
8、該試劑盒*反應(yīng)溫度為25℃，溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
【儲(chǔ)存】
原包裝應(yīng)儲(chǔ)存于2～8℃保鮮冷藏，切勿冷凍。
【有效期】
有效期12個(gè)月;生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)批號(hào)見(jiàn)外包裝。