今日推薦qiagen外泌體提取試劑盒76064
英文名:exoEasy Maxi Kit
詳細產品信息:
從血漿、血清及細胞培養(yǎng)上清中純化外泌小體及其他細胞外囊泡(EV)
可分離獲得完整的exosome及其他細胞外囊泡
適用于功能性檢測及物理和生化分析
可在25分鐘內純化獲得exosome及其他細胞外囊泡
可通過簡單的離心柱實驗方案平行處理多個樣品
可提取高達4 ml的血漿或血清,或者32 ml的細胞培養(yǎng)上清
exoEasy Maxi Kit - 25分鐘內完成外泌小體純化。
exoEasy Maxi Kit可從預過濾的血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清中在25分鐘內提取獲得細胞外囊泡。洗脫下來的囊泡可即用于物理或生化性質分析,或可進行緩沖液交換及濃縮,可使用如超濾技術等方法。
Performance
用于純化外泌小體及其他細胞外囊泡的exoEasy實驗方案不僅比超速離心更加快捷,而且可獲得更潔凈的純化產物。掃描電子顯微鏡顯示兩種技術均可提供完整的預期尺寸的囊泡,不過通過超速離心法制得的樣品中還含有一些并不符合EV尺寸或外形的更小的結構。
提取獲得的囊泡具有完整的功能,可用于多種下游應用,包括細胞培養(yǎng)等工作。洗脫的囊泡的性質和數(shù)量可通過多種不同的方法進行測定。其中包括電子顯微鏡、物理特征描述(例如,納米顆粒追蹤分析(NTA),或可調電阻脈沖感應(TRPS))、微粒分子成分分析(例如蛋白質、核酸或脂類)等。由于如NTA或TRPS等微粒計數(shù)方法無法將囊泡與其他懸浮顆粒區(qū)分開,使用未經處理的生物液體或仍含有其他顆粒物(例如,蛋白復合物)的粗制備樣品進行顆粒計數(shù)可能會明顯地高估囊泡數(shù)目。
Principle
exoEasy Kit在傳統(tǒng)的超速離心exosome或微泡提取方法的基礎上進行了改進,可在25分鐘內獲得純化的細胞外囊泡。
exoEasy Maxi Kit使用了膜親和結合步驟來從血漿、及血清或細胞培養(yǎng)上清中分離exosome及其他EV。這種方法無法通過大小或細胞來源對EV進行區(qū)分,也不依賴于是否存在微粒表位。它運用了囊泡的通用生化特性來提取樣品中的所有細胞外囊泡(參見圖片使用NTA對由exoEasy Maxi Kit提取獲得的細胞外囊泡進行性質分析)。因此,必須*去除細胞、細胞碎片、凋亡小體等組分,可在開始提取步驟前對樣品進行離心或過濾等操作。
exoEasy Maxi Kit使用了膜親和離心柱來地從血漿、血清、細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體中提取獲得exosome及其他細胞外囊泡。Maxi規(guī)格的離心柱可允許處理大體積的樣品,包括高達4 ml的血漿或血清,或者32 ml的細胞培養(yǎng)上清。實驗流程非??焖僖恢拢浅_m用于提取EV進行exosome及其他細胞外囊泡的功能性分析。
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