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GIBCO(life)G418 GENETICIN抗生素

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GIBCO(life)G418 GENETICIN抗生素
貨號:11811-031
規(guī)格:5g
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GIBCO(life)G418 GENETICIN抗生素

英文描述:Geneticin® Selective Antibiotic (G418 Sulfate), Powder

晶體、未消毒(G418 硫酸鹽)
穩(wěn)定性: 非常穩(wěn)定,可以粉末形式在室溫下 (15°C 至 30°C) 保存zui多 3 年;可溶于水。

 

GIBCO(life)G418 GENETICIN抗生素

規(guī)格

Validated Application:Eukaryotic Selection⁄Stable Cell Line Generation
Agent:Geneticin® (G-418)
Form:Powder
Reagent Type:Antibiotic (Selective)
Product Size:5 g
Shipping Condition:Room Temperature

GIBCO(life)G418 GENETICIN抗生素

 

G418(G-418即G-418 sulfate,也稱Geneticin,分子式為C20H40N4O10.2H2SO4,分子量為692.71 g/mole)是一種氨基糖類抗生素,其結(jié)構(gòu)與新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似,它通過影響80S核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對原核和真核等細(xì)胞都有毒性 ,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞 ,也包括原生動(dòng)物和蠕蟲。是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后 ,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。
        G418和篩選
        篩選之前由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同,而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定G418的zuijia篩選濃度。具體如下:將細(xì)胞稀釋到1000個(gè)細(xì)胞/mL,在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內(nèi)進(jìn)行篩選,選擇出在10~14天內(nèi)使細(xì)胞全部死亡的zui低G418濃度來進(jìn)行下一步的篩選試驗(yàn)。
        由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同,一般變動(dòng)在100ug/ml~1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定你的細(xì)胞對這一批G418的篩選濃度。盡管如此,特性明確的細(xì)胞系G418的zuijia用量還是穩(wěn)定的。《分子克隆》給出了幾個(gè)常用細(xì)胞系所需G418的zuijia用量 :

細(xì)胞系或機(jī)體

 G418濃度(ug/ml)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞

700~800

Madin-Darby犬腎細(xì)胞

500

人上皮A431細(xì)胞

400

猿CV-1細(xì)胞

500

盤基網(wǎng)柄菌屬

10~35

植物

10

酵母

125~500

 

 

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