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上海力敏實(shí)業(yè)有限公司
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Sino Biological

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產(chǎn)品型號(hào)M293TI

品       牌

廠(chǎng)商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-07-26 10:12:17瀏覽次數(shù):2597次

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Sino Biological SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基
規(guī)格:1000ml
SMM 293-TI培養(yǎng)基適用于貼壁、懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293家族的HEK293EBNA及相關(guān)的細(xì)胞(如HEK293-F、HEK293H 、HEK293T、HEK293S、HEK293FT)的長(zhǎng)期生長(zhǎng)和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。
SMM 293-TI含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的全部營(yíng)養(yǎng)成份,無(wú)需添加任何添加物。

Sino Biological SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基

產(chǎn)品描述:

SMM 293-TI培養(yǎng)基適用于貼壁、懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293家族的HEK293EBNA及相關(guān)的細(xì)胞(如HEK293-F、HEK293H 、HEK293T、HEK293S、HEK293FT)的長(zhǎng)期生長(zhǎng)和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。

SMM 293-TI含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的全部營(yíng)養(yǎng)成份,無(wú)需添加任何添加物即可使用。其化學(xué)成分明確,主要包含細(xì)胞生長(zhǎng)所需的無(wú)機(jī)鹽, HEPES, 碳酸氫鈉, 必需和非必需氨基酸, 維生素, 酚紅, 微量元素, PluronicÒ F-68和其他無(wú)機(jī)物(注意:此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清)。

Sino Biological SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基

產(chǎn)品特點(diǎn):

• HEK293細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基• 即用型*培養(yǎng)基,不用添加其他組分
• 培養(yǎng)基批次間性能穩(wěn)定,同類(lèi)產(chǎn)品性能更*• 無(wú)動(dòng)物源組分,無(wú)血清,化學(xué)成分明確
• 轉(zhuǎn)染前后無(wú)需更換培養(yǎng)基• 上千蛋白表達(dá)成功案例
• 適用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定株轉(zhuǎn)染以及培養(yǎng)• 適用于細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)和大規(guī)模的反應(yīng)器培養(yǎng)

SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基

 

 

產(chǎn)品參數(shù):

外觀(guān)澄清紅色溶液適用細(xì)胞株HEK293EBNA及相關(guān)的細(xì)胞(如HEK293F、HEK293T、HEK293H 、HEK293S、HEK293FT)
滲透壓275±10 mOsm/kg細(xì)胞接種密度0.3-0.6×106 cells/mL
pH值6.0–6.5倍增時(shí)間< 26 hrs(因細(xì)胞類(lèi)型、狀態(tài)影響而存在數(shù)值變化)
無(wú)菌檢測(cè)無(wú)菌細(xì)胞培養(yǎng)評(píng)價(jià)優(yōu)良
內(nèi)毒素< 10 EU/mL產(chǎn)品用途僅用于科學(xué)研究,不推薦用于人類(lèi)或動(dòng)物的診斷和治療
有效期6個(gè)月儲(chǔ)存條件2-8 ℃,避光
SMM 293-TI培養(yǎng)基為澄清紅色透明液體,2~8℃避光保存,如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁或出現(xiàn)沉淀,請(qǐng)勿使用。

產(chǎn)品使用效果:

細(xì)胞密度高
SMM 293-TI培養(yǎng)基在HEK293T 的培養(yǎng)上更具優(yōu)勢(shì)。下圖從細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)以及細(xì)胞活率兩個(gè)方面,展示了四種培養(yǎng)基對(duì)HEK293T細(xì)胞的培養(yǎng)效果,SMM 293-TI培養(yǎng)基明顯具有不亞于國(guó)外的質(zhì)量。
cell-culture-in-SMM-293-T1
成功表達(dá)多種重組蛋白質(zhì)
SMM 293-TI 成功應(yīng)用于多種重組蛋白質(zhì)的表達(dá)生產(chǎn),獲得上千個(gè)高品質(zhì)的蛋白質(zhì)產(chǎn)品。其中一種Fc標(biāo)簽融合蛋白的產(chǎn)量高達(dá)2.5g/L。
protein-production-in-SMM-293-T1

產(chǎn)品使用方法:

細(xì)胞復(fù)蘇:
  1. 迅速取出凍存的細(xì)胞,在37 ℃水浴條件下進(jìn)行解凍(可以在水中輕輕晃動(dòng),時(shí)間控制在30s以?xún)?nèi));
  2. 輕輕地混勻細(xì)胞并將融化的細(xì)胞全部移至50 mL無(wú)菌離心管中,逐滴加入10 mL預(yù)熱到37℃的培養(yǎng)基,離心換液(100 g,3 min)去除全部上清,加入293新鮮培養(yǎng)基重懸,使得細(xì)胞密度達(dá)到0.4~0.6×106cells/mL;
  3. 將細(xì)胞置于37℃,5%CO2,轉(zhuǎn)速為110~175rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng);
  4. 2-5天后通過(guò)人工或儀器測(cè)定細(xì)胞的密度以及活率,如果細(xì)胞密度達(dá)到1.0×106cells/mL,活率85%以上則可進(jìn)行傳代培養(yǎng);
  5. 如果細(xì)胞密度低于1.0×106cells/mL,則建議對(duì)細(xì)胞進(jìn)行離心(100g,5min),然后重懸于20-30mL 的新鮮培養(yǎng)基中使得細(xì)胞密度為0.6×106cells/mL 左右,并繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞正常生長(zhǎng)則可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染:
SMM 293-TI培養(yǎng)基中,用Sinofection®轉(zhuǎn)染試劑(貨號(hào)STF01),可以實(shí)現(xiàn) HEK293 細(xì)胞的高轉(zhuǎn)染效率。具體細(xì)節(jié)可以參考Sinofection® 轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書(shū)。
細(xì)胞馴化:
懸浮的HEK293 cells幾乎不用馴化就可直接適應(yīng)SMM 293-TI培養(yǎng)基。如果直接更換培養(yǎng)基失敗則推薦下面兩種方式來(lái)馴化HEK293細(xì)胞使其適應(yīng)SMM 293-TI培養(yǎng)基:1)直接馴化;2)逐步馴化。
1)直接馴化:
  1. 將培養(yǎng)在加有5~10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基里的細(xì)胞,直接稀釋傳代到SMM 293-TI培養(yǎng)基中,細(xì)胞密度控制在0.3~0.4×106cells/mL;
  2. 將細(xì)胞置于37 ℃,5% CO2,轉(zhuǎn)速為110~175 rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng);
  3. 4~6天后對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋?zhuān)ɑ蛘唠x心更換上清),保持稀釋?zhuān)ɑ蛘唠x心)后細(xì)胞密度為0.3~0.4×106cells/mL;
  4. 經(jīng)過(guò)在100%的 SMM 293-TI培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng),傳代后4~6天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2~3×106cells/mL,細(xì)胞活率大于90%。這說(shuō)明細(xì)胞已經(jīng)*適應(yīng)了SMM 293-TI培養(yǎng)基,之后進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞的起始密度可以降到0.2~0.3×106/ml左右。
注意:如果直接馴化效果欠佳,可采用逐步馴化的方法。
2)逐步馴化:
  1. 將培養(yǎng)在加有5~10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基里的細(xì)胞,直接稀釋傳代到SMM 293-TI培養(yǎng)基中,細(xì)胞密度控制在0.3~0.4×106cells/mL,原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為75:25;
  2. 將細(xì)胞置于37℃,5%CO2,轉(zhuǎn)速為110-175rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng);
  3. 4~6天后進(jìn)行傳代,如果細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,且活率>90% 則傳代時(shí)原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為50:50,細(xì)胞密度仍控制在0.3~0.4×106cells/mL。如細(xì)胞生長(zhǎng)慢,可離心上清,留20%原培養(yǎng)基,加入80% 的新鮮SMM 293-TI培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng);
  4. 重復(fù)步驟3逐步增加SMM 293-TI培養(yǎng)基所占的比例(原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90)直到100%的SMM 293-TI培養(yǎng)基;
  5. 經(jīng)過(guò)在100%的 SMM 293-TI培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng),傳代后4~6天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2~3×106cells/mL,細(xì)胞活率大于90%。這說(shuō)明細(xì)胞已經(jīng)*適應(yīng)了SMM 293-TI培養(yǎng)基,之后進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞的起始密度可以降到0.2~0.3×106cells/mL。

 

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