細胞凋亡熒光檢測試劑盒（NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis

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更新時間：2018-05-31 22:55:09瀏覽次數(shù)：1389次

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  熒光染料

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產品簡介

該試劑盒包含兩種主要的染料NucViewTM 488 caspase-3 底物和MitoViewTM 633線粒體染料，可以非常方便的同時顯示細胞凋亡中Caspase-3的活力以及線粒體膜電位的變化。方法可以選擇流式細胞術或者熒光顯微鏡，兩種染料的光譜分離使得熒光的重疊現(xiàn)象降為Z小。

詳細介紹

該試劑盒包含兩種主要的染料NucView^TM 488 caspase-3 底物和MitoView^TM 633線粒體染料，可以非常方便的同時顯示細胞凋亡中Caspase-3的活力以及線粒體膜電位的變化。方法可以選擇流式細胞術或者熒光顯微鏡，兩種染料的光譜分離使得熒光的重疊現(xiàn)象降為zui小。

試劑盒原理：

Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中caspase-3為關鍵的執(zhí)行分子，它在凋亡信號傳導的許多途徑中發(fā)揮功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞漿中，在凋亡的早期階段，它被激活?；罨腃aspase-3能夠特異切割底物DEVD-NucView 488。根據(jù)這一特點，Biotium 將一段帶有大量負電荷的DEVD肽連接到一種能和DNA結合的染料上。底物本身不能產生熒光，但是這種底物可以快速的穿過細胞膜進入細胞質并在這里被活化的Caspase-3剪切，從而釋放出和DNA有高親和力的染料，釋放出來的染料遷移進入細胞核并把細胞核染成亮綠色。根據(jù)釋放的熒光強度的大小，可以測定caspase-3的活性，從而反映Caspase-3被活化的程度。從這里我們可以得出：這個熒光底物不同于傳統(tǒng)的底物，它實現(xiàn)活細胞 Caspase-3 活性檢測的同時染色細胞核DNA，具有典型的雙功能性。

線粒體跨膜電位的降低是細胞凋亡早期的不可逆事件，引起一系列線粒體相關變化。MitoView^TM 633是一種遠紅外線粒體熒光染料（一種親脂性陽離子化合物），在正常細胞中依據(jù)線粒體膜電位（外正內負）的存在，逐漸擴散進質膜并沉積在線粒體內，在激發(fā)光下放出熒光，可以非常方便地使用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡來觀察線粒體的形態(tài)和移動的變化情形。例如下圖，活的Hela細胞用MitoView^TM 633染色結果

HeLa cells were stained with MitoView 633 for 30 min, rinsed in PBS, and fluorescence was visualized on an Olympus epifluorescence microscope using a Cy5 filter. Image is a representative live HeLa cell stained with MitoView 633.

但是，在開始凋亡細胞中，線粒體膜電位的降低，MitoView^TM 633染料不會（或少量）進入線粒體，這樣，開始凋亡細胞相對于健康活細胞來說，被MitoView^TM 633染色很少或者沒有，與caspase-3底物DEVD-NucView 488形成一種負相關的關系，如下圖所示：

Microscopy of Jurkat cells stained with NucViewTM 488 and MitoViewTM 633. Healthy cells are strongly stained with MitoView^TM 633 （red） while the apoptotic cell with fragmented nucleus is strongly stained with NucView^TM 488 （green）. There is an inverse correlation between these probes.

某種情況下，尋找NucView^TM 488 和MitoView^TM 633熒光染料合適的工作液濃度非常重要，有一些高濃度情況下，這些染料探針有可能對細胞的其他結構進行著色。

試劑盒內容物：

1 vial （100 μL）; NucView^TM 488 Caspase-3 substrate, 200X in DMSO

1 vial （100 μL）; MitoView^TM 633 Mitochondrial Dye, 200X in DMSO

貨號	產品名稱	規(guī)格
30062	NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis Kit 細胞凋亡熒光檢測試劑盒	100次

其它細胞凋亡熒光檢測產品：

貨號

產品名稱

規(guī)格

70055

MitoView 633

20 X 50ug

10400

NucView^TM 488 Caspase-3 Enzyme Substrate 1mM in 1X PBS

100 uL

30001

JC-1 mitochondrial membrane potential detection kit

100 assays

30008-1

Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric & Colorimetric Assay Kit （25 assays）

kit

30008-2

Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric & Colorimetric Assay Kit （100 assays）

kit

30009-1

Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit

1 mL

30009-2

Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit

10 mL

30009-3

Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit

100 mL

30011-1

Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric and Colorimetric Assay Kit

25 assays

30011-2

Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric and Colorimetric Assay Kit

100 assays

30012-1

Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit

1 mL

30012-2

Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit

10 mL

30012-3

Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit

100 mL

30017

Apoptosis & Necrosis Quantification Kit

50 assays

30018

Apoptotic, Necrotic & Healthy Cells Quantification Kit

50 assays

30019

MCB Glutathione Detection Kit

100 assays

30029

NucView^TM 488 Caspase-3 Assay Kit for live cells

活細胞caspase-3熒光檢測試劑盒

100 – 500A

30030

NucView^TM 488 caspase-3 substrate and sulforhodamine 101-annexin V （also called Texas Red^TM-annexin V）dual apoptosis assay kit

雙凋亡檢測試劑盒

50 - 250 assays

30060

CF488A Annexin V and 7-AAD Apoptosis Kit

細胞凋亡熒光檢測試劑盒

100 assays

30061

CF488A Annexin V and PI Apoptosis Kit

細胞凋亡熒光檢測試劑盒

100 assays

70054

MitoView Green

20X50ug