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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2016-07-14 09:03:54瀏覽次數(shù):331次

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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒原理:用純化的抗體包被微孔板,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒提供免費(fèi)待測(cè)

規(guī)格:96孔配置/48孔配置

用途:僅用于科研

保存溫度:2-8℃低溫保存

適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,

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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及標(biāo)本的處理:

在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行

檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBSPH7.2-7.4稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒

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