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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>人S蛋白100(S-100)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
檢測(cè)范圍: 96T
60ng/L -2400 ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中S蛋白100(S-100)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人S蛋白100(S-100)水平。用純化的人S蛋白100(S-100)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入S蛋白100(S-100),再與HRP標(biāo)記的S蛋白100(S-100)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的S蛋白100(S-100)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人S蛋白100(S-100)濃度。
試劑盒組成
1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標(biāo)試劑
6ml×1瓶
8
標(biāo)準(zhǔn)品(4000ng/L)
0.5ml×1瓶
3
酶標(biāo)包被板
12孔×8條
9
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說(shuō)明書(shū)
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個(gè)
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2000ng/L
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1000ng/L
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
500ng/L
3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
250ng/L
2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125ng/L
1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒 Human golgi protein 73,GP-73 ELISA試劑盒
人TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒 Human TU3A Protein ELISA試劑盒
人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒 Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA試劑盒
人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒 Human dermato-pontin,DPT ELISA試劑盒
人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒 Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA試劑盒
人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒 Human decay-accelerating factor,DAF ELISA試劑盒
人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒 Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA試劑盒
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA試劑盒
人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA試劑盒
人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒 Human urease related protein C,UreC ELISA試劑盒
人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA試劑盒
人錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒 Human ankyrin B,Ank-B ELISA試劑盒
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒 Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA試劑盒
人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 Human recombination activating gene 2,RAG-2 ELISA試劑盒
人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒 Human recombination activating gene 1,RAG-1 ELISA試劑盒
人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 Human NOD-like receptor9,NLR ELISA試劑盒
人*誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒 Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA試劑盒
人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒 Human scavenger receptor B,SRB ELISA試劑盒
人殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒 Human cecropin B,CecB ELISA試劑盒
人抗菌肽(Att)ELISA試劑盒 Human Attacin,Att ELISA試劑盒
人顆粒溶素(GNLY)ELISA試劑盒 Human granulysin,GNLY ELISA試劑盒
人富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒 Human histatin 5,HTN5 ELISA試劑盒
*樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒 Human Ig-like transcripts Receptor,ILTsR ELISA試劑盒
人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒 Human filamentous hemagglutinin,FHA ELISA試劑盒
人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒 Human cytovillin/ezrin,CVL ELISA試劑盒
人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒 Human cyclophilin A,CyPA ELISA試劑盒
人肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)ELISA試劑盒 Human dystrophin ELISA試劑盒
人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒 Human Collectin ELISA試劑盒
人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒 Human chaperonin 10,CPN10 ELISA試劑盒
人纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒 Human fibromodulin,FMOD ELISA試劑盒
人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒 Human Calreticulin,CRT ELISA試劑盒
人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒 Human omentin ELISA試劑盒
人基質(zhì)γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒 Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA試劑盒
人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)ELISA試劑盒 Human matrilysin,MAT ELISA試劑盒
人螺旋肽(THP)ELISA試劑盒 Human triple-helical peptide,THP ELISA試劑盒
人溶酶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒 Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA試劑盒
人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA試劑盒 Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA試劑盒
人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA試劑盒 Human Opacity-associated proteins,OPAs ELISA試劑盒
人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒 Human flagellin ELISA試劑盒
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 Human Poly Serium Antigen,PHSA ELISA試劑盒
人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒 Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA試劑盒
人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA試劑盒 Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA試劑盒
人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 Human Ubiquitin,Ub ELISA試劑盒
人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒 Human orosomucoid,ORM ELISA試劑盒
人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒 Human Elastin,ELN ELISA試劑盒
人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒 Human Involucrin,iNV ELISA試劑盒
人肌腱蛋白R(shí)(TN-R)ELISA試劑盒 Human tenascin-R,TN-R ELISA試劑盒
人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒 Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA試劑盒
人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒 Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA試劑盒
人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒 Human Agrin ELISA試劑盒
人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA試劑盒 {試劑酶聯(lián)網(wǎng):www.shjgogo.com}
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