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各種類型ELISA測定時一般需經過以下步驟：固相包被 → 加待測樣品 → 溫育 → 滌+加酶標物 →溫育 → 洗滌 → 加底物 → 溫育一加終止液→比色 → 判定結果。
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許多試劑檢測都涉及到標準曲線的問題，標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果，甚至是關系到實驗的成敗，那么究竟如何繪制或制作標準曲線呢？

小鼠P物質受體（SP-R）ELISA試劑盒-ELISA標準曲線的繪制要點:

1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結果無從談起。

2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內。

3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。

4、檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。

5、標準曲線的樣品數一般為7個點，但至少要保證有5個點。

6、做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動，但一般來說，相關系數R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999.
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