人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒(elisa kit)
中文簡稱:人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白ELISA試劑盒 英文簡稱:(LUM)ELISA KIT
ELISA簡介 內(nèi)容目錄導(dǎo)航:ELISA簡介 ELISA試劑組成 ELISA測定步驟 ELISA試劑展示
人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒(elisa kit)敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實驗診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等特點。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。ELISA常用方法:雙抗體夾心法測定。規(guī)格:96T/48T。試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%。保存條件及有效期:試劑盒保存:2-8℃,有效期:6個月。
ELISA試劑組成
1.抗原 在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
2.抗體 在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。多抗取白免疫動物的抗血清,制備較簡單,但抗血清成分復(fù)雜,除含針對抗原(多個表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對要低于單抗,且制備周期長,批間差異較大。
3.酶和底物 在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP
(1)HRP:是一種糖蛋白,含糖量約18%,分子量為44kD,在蔬菜作物辣根中含量很高。(2)ALP:是一種磷酸酯的水解酶,用做示蹤酶的ALP活性應(yīng)在l 000U/mg以上。
4.固相載體 固相載體是ELISA中用以分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物的主要手段,應(yīng)與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
5.包被 將免疫活性物質(zhì)(抗原或抗體)結(jié)合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等;常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-*間接包被法。
ELISA測定步驟
人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒(elisa kit)測定時一般需經(jīng)過以下步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個方面。
1.隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動,因此有必要對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,例如對血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測中,還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)??捎孟窗鍣C(jī)洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀(酶標(biāo)儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。
ELISA試劑展示
人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒(elisa kit)
每種濃度20ug/ml,溶于丙酮(68 compounds, each 20ug/ml in Acetone) ,包裝規(guī)格(1ml ,5ml ) 西瑪津 CAT 甲草胺 Alachlor 禾草丹 Benthiocarb 敵瘟磷,克瘟散 EDDP 惡唑磷 Isoxathion 咯喹酮 Pyroquilon 二嗪磷 Diazinon 四氯苯酞 Fthalide 殺螟硫磷 MEP 苯噻草胺 Mefenacet 稻瘟靈 Isoprothiolane 丙草胺 Pretilachlor 百菌清 TPN 異丙威,葉蟬散 MIPC 炔苯酰草胺 Propyzamide 噻吩草胺,甲氧噻草胺 Thenylchlor 敵敵畏 DDVP 殺撲磷 Methidathion (DMTP) 仲丁威 BPMC 溴丁酰草胺 Bromobutide 草枯醚 CNP 禾草敵 Molinate 異稻瘟凈 IBP 腐霉利 Procymidone 苯硫磷 EPN 莎稗磷 Anilofos 異柳磷 Isofenphos 莠去津 Atrazine 毒死蜱 Chlorpyrifos 敵草腈 DBN 敵百蟲 DEP 樂果 Dimethoate 噠嗪硫磷 Pyridaphenthion α-硫丹 alpha-Benzoepin 異菌脲 Iprodione β-硫丹 beta-Benzoepin 氯唑靈 Echlomezol 醚菊酯 Ethofenprox 克菌丹 Captan 倍硫磷 MPP 氯甲氧苯 Chloroneb 馬拉硫磷 Malathion
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