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大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶（CACT）ELISA試劑盒（elisa kit）
中文簡稱:大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒英文簡稱:（CACT）EELISA KIT

內(nèi)容目錄導(dǎo)航：ELISA簡介 ELISA試劑組成 ELISA測定步驟 ELISA試劑展示

ELISA簡介
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶（CACT）ELISA試劑盒（elisa kit）敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等特點。使用方法一：96T ELISA試劑盒（標(biāo)本90個，標(biāo)準(zhǔn)曲線6個|標(biāo)本94個，標(biāo)準(zhǔn)對照2個）。使用方法二：48T ELISA試劑盒（標(biāo)本42個，標(biāo)準(zhǔn)曲線6個|標(biāo)本47個，標(biāo)準(zhǔn)對照1個）。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。ELISA常用方法：雙抗體夾心法測定。規(guī)格：96T/48T。試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%。保存條件及有效期：試劑盒保存：2-8℃，有效期：6個月。

ELISA實驗中zui可能出現(xiàn)問題
一、所有孔未顯色 1、分析原因： 1）微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。 2）用錯試劑。 3）在操作中忘記加酶或抗體。 2、解決辦法： 1）檢查洗板器械，比如洗板機管道是否堵塞、洗液是否用完。 2）在加樣前，要看清瓶簽。 3）嚴(yán)格按說明書操作步驟進行實驗，確保每步都到位。二、所有孔顯色偏低 1、分析原因： 1）微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。 2）洗板不干凈。 3）抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。 4）溫度沒達到要求。 5）每孔加入的試劑量低于說明書要求量。 2、解決辦法： 1）手工加蒸餾水洗板時，要避免吸頭接觸微孔，常更換新的蒸餾水。 2）洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水（約400ul），且至少洗板五次。 3）嚴(yán)格按說明書要求操作，每次取樣要更換吸頭。 4）控制孵育溫度在25℃。 5）加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足，加樣時務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。

ELISA測定步驟
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶（CACT）ELISA試劑盒（elisa kit）測定時一般需經(jīng)過以下步驟：固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個方面。

1．隨著病情的進展或由其他因素影響，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動，因此有必要對標(biāo)本進行預(yù)處理，例如對血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋，或離心分離血脂等。間接法測定中，標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2．加樣一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3．在成批手工檢測中，還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不*，對競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4．洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物，終止抗原抗體反應(yīng)，除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)?？捎孟窗鍣C洗板或手工洗板，前者洗滌質(zhì)量較好，各反應(yīng)孔洗滌效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。
5．準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀（酶標(biāo)儀），比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值（A值）。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。

ELISA試劑展示
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶（CACT）ELISA試劑盒（elisa kit）
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