大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶（ADAMTS13/vWF-cp）ELISA試劑盒（elisa kit）
中文簡(jiǎn)稱:大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶ELISA試劑盒 英文簡(jiǎn)稱:（ADAMTS13/vWF-cp）EELISA KIT
ELISA簡(jiǎn)介 內(nèi)容目錄導(dǎo)航：ELISA簡(jiǎn)介 ELISA試劑組成 ELISA測(cè)定步驟 ELISA試劑展示
大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶（ADAMTS13/vWF-cp）ELISA試劑盒（elisa kit）敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等特點(diǎn)。使用方法一：96T ELISA試劑盒（標(biāo)本90個(gè)，標(biāo)準(zhǔn)曲線6個(gè)|標(biāo)本94個(gè)，標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照2個(gè)）。 使用方法二：48T ELISA試劑盒（標(biāo)本42個(gè)，標(biāo)準(zhǔn)曲線6個(gè)|標(biāo)本47個(gè)，標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照1個(gè)）。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。ELISA常用方法：雙抗體夾心法測(cè)定。規(guī)格：96T/48T。試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%。保存條件及有效期：試劑盒保存：2-8℃，有效期：6個(gè)月。
ELISA實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問題
一、 所有孔未顯色 1、分析原因： 1） 微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。 2） 用錯(cuò)試劑。 3） 在操作中忘記加酶或抗體。 2、解決辦法： 1） 檢查洗板器械，比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。 2） 在加樣前，要看清瓶簽。 3） 嚴(yán)格按說明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，確保每步都到位。 二、 所有孔顯色偏低 1、分析原因： 1） 微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。 2） 洗板不干凈。 3） 抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。 4） 溫度沒達(dá)到要求。 5） 每孔加入的試劑量低于說明書要求量。 2、解決辦法： 1） 手工加蒸餾水洗板時(shí)，要避免吸頭接觸微孔，常更換新的蒸餾水。 2） 洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水（約400ul），且至少洗板五次。 3） 嚴(yán)格按說明書要求操作，每次取樣要更換吸頭。 4） 控制孵育溫度在25℃。 5） 加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足，加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。
ELISA測(cè)定步驟
大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶（ADAMTS13/vWF-cp）ELISA試劑盒（elisa kit）測(cè)定時(shí)一般需經(jīng)過以下步驟：固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個(gè)方面。
1．隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響，某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng)，因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋，或離心分離血脂等。間接法測(cè)定中，標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2．加樣一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
3．在成批手工檢測(cè)中，還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不*，對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大，不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4．洗滌是ELISA操作過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物，終止抗原抗體反應(yīng)，除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)?？捎孟窗鍣C(jī)洗板或手工洗板，前者洗滌質(zhì)量較好，各反應(yīng)孔洗滌效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。
5．準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測(cè)讀儀（酶標(biāo)儀），比色法判讀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)，根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長(zhǎng)的濾光片，以空白孔校零測(cè)定反應(yīng)孔的吸光度值（A值）。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。
ELISA試劑展示
大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶（ADAMTS13/vWF-cp）ELISA試劑盒（elisa kit）
血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào) 250 供分離營(yíng)養(yǎng)要求非常高的致病菌用，后加血液制成血平板 Blood Agar Base N0.2 血液瓊脂基礎(chǔ) 250 供分離營(yíng)養(yǎng)要求較高的致病菌用，后加血液制成血平板 Blood Agar Base 血液* 250 用于從血液中分離病原菌 Blood Enrichment Medium 氯化三苯四氮唑-沙保羅培養(yǎng)基 250 用于分離真菌，酵母菌等 TTC-Sabourand’s Medium 麥康凱瓊脂 250 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)（OXOID方法） Maconkey Agar 麥康凱瓊脂（不含鹽） 250 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)（OXOID方法） Maconkey Agar（without salt） 麥康凱瓊脂2號(hào) 250 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)（OXOID方法） Maconkey Agar No.2 麥康凱瓊脂3號(hào) 250 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)（OXOID方法） Maconkey Agar No.3 堿性瓊脂平板 250 用于分離霍亂弧菌 Alkaline Agar 堿性膽鹽瓊脂 250 用于分離霍亂弧菌 Alkaline Bile Salt Agar
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