中英文名稱:兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒;Rabbit pigment epithelium-derived factor (PEDF) ELISA Kit產(chǎn)品性狀:試劑(瓶裝)
科研范疇:elisa試劑盒系列
產(chǎn)品用途:供科研單位,各大高校等用于科研實(shí)驗(yàn).
產(chǎn)品儲存:2-8°C
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
使用注意事項(xiàng):試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
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兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)PCR-SSP分析實(shí)驗(yàn)原理和步驟PCR 序列特異性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能夠特異識別特定等位基因的引物通過PCR 擴(kuò)增檢測序列多態(tài)性的方法,也稱作等位基因特異性引物PCR 法。本實(shí)驗(yàn)是應(yīng)用PCR-SSP 法檢測MN 基因型。[實(shí)驗(yàn)原理]根據(jù)決定某等位基因的堿基性質(zhì),設(shè)計(jì)3´端*個(gè)堿基分別與各等位基因的特異性堿基相匹配的序列特異性引物,在PCR 反應(yīng)過程中,只有引物3´端*個(gè)堿基與決定特定等位基因的堿基互補(bǔ)時(shí)才能實(shí)現(xiàn)DNA 片段的*復(fù)制,根據(jù)PCR 產(chǎn)物的有無進(jìn)行等位基因的分型。
[實(shí)驗(yàn)方法]1.PCR 擴(kuò)增 PCR 反應(yīng)體系為20μl(2 個(gè)體系,分別為引物1 和引物2),含模板2μl(約50ng),引物各1.5μl,dNTP1.6μl(0.4mM),10×Buffer 緩沖液2μl,Taq 酶1.0U,加雙蒸水至20.0μl;PCR 反應(yīng)條件為94℃4min,94℃1.5min/52℃2.0min/72℃2.0min,30 個(gè)循環(huán)。2.PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測 取PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物2μl,6%聚丙烯酰胺凝膠電泳(T=6%,C=3.3%,凝膠規(guī)格為82mm×64mm×0.75mm)。電極緩沖液為1×TBE。將加有1/5 體積上樣緩沖液的酶切產(chǎn)物電泳,220 v 電壓,電泳2-3h。銀染顯色[結(jié)果判定]根據(jù)電泳譜帶的有無判定等位基因型別,僅有1 個(gè)體系檢測到譜帶者為相應(yīng)特異性引物對應(yīng)型(M 或N),2 個(gè)體系均檢測到譜帶者為MN 型。[實(shí)驗(yàn)討論]1.注意事項(xiàng) ①如引物結(jié)合序列存在堿基變異可能無擴(kuò)增產(chǎn)物,導(dǎo)致錯(cuò)誤判型;②在對照樣品分型準(zhǔn)確的基礎(chǔ)上才能判定結(jié)果。2.方法評價(jià) 該方法操作簡單,引物設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)的復(fù)性條件要求較高。
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AB0062-250g Ammonium fluoride 氟化銨 [12125-01-8] 250g
A6063-250g Ammonium fluoroborate 氟硼酸銨 [13826-83-0] 250g
AS0014-250g Ammomium formate 甲酸銨 [540-69-2] 250g
C6314-25g Crocein scarlet 7B 酸性猩紅7B [6226-76-2] 25g
C0528-25g Crystal violet 結(jié)晶紫 [548-62-9] 25g
A6434-25g Ammonium hexafluorophosphate 六氟磷酸銨 [16941-11-0] 25g
A2133-500g Ammonium hydrogen difluoride 氟化氫銨 [1341-49-7] 500g
AB0063-250g Ammonium hydrogen tartrate 酒石酸氫銨 / 250g
A2742-100g Ammonium iodide 碘化銨 [12027-06-4] 100g
AB0065-500g Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate *銨六水 [7783-85-9] 500g
A2657-500g Ammonium iron(II) sulfate, dodecahydrate 硫酸鐵銨十二水 [7783-83-7] 500g
AB0066-100g Ammonium metavanadate 偏釩酸銨 [7803-55-6] 100g
AB0067-50g Ammonium molybdate, tetrahydrate 鉬酸銨四水 [12054-85-2] 50g
AB0067-250g Ammonium molybdate, tetrahydrate 鉬酸銨四水 [12054-85-2] 250g
AB0068-100g Ammonium nickel(II) sulfate, hexahydrate 硫酸鎳銨六水 [7785-20-8] 100g
AB0070-500g Ammonium oxalate hydrate 草酸銨 [6009-70-7] 500g
A1531-1kg Ammonium pentaborate 五硼酸銨 [234-521-1] 1kg
C6184-100g Cinnamamide 肉桂酰胺 [621-79-4] 100g
CT1416-25g o-Cresolphthalein 鄰甲* [596-27-0] 25g
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