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大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒

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大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒
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大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒
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操作步驟
加樣:分別設(shè)空白孔空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。
配液:將30(48T20倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T20倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:將30(48T20倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T20倍稀釋后備用。
洗滌:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
10測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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