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PCR的應(yīng)用-谷研生物
、特定DNA 段(基因、調(diào)控序列)的鑒定、分離或制備。
A、DNA B、cDNA
2、基因表達(dá)分析(原位、離體)
A、基因是否表達(dá)
B、基因表達(dá)水平高低
3、基因突變
基因克?。ǎ遥裕校茫遥?br />原位PCR分析基因表達(dá)的組織特異性
. 細(xì)胞或組織固定:細(xì)胞經(jīng)固定和乙醇通透化處理后便適于一般PCR試劑(包括引物和Taq酶)進(jìn)入
2. PCR擴(kuò)增細(xì)胞內(nèi)目的片段
3. 原位雜交檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物
熒光定量 PCR(real-time PCR)分析基因表達(dá)水平
通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過程,結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,計(jì)算待測(cè)樣品的初始模板量。
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