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各種ELISA試劑盒配置方法匯總如下:() ELISA試驗停止液(2) ELISA底物緩沖液(3) ELISA試驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運用液(4)ELISA試驗包被緩沖液(5)ELISA試驗洗刷緩沖液(6)ELISA試驗稀釋液(7)規(guī)范品稀釋液。
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() ELISA試驗停止液(2M H2SO4):
蒸餾水78.3ml,逐滴參加濃硫酸(98%)2.7ml。
(2) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.M 檸檬酸(9.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
(3) ELISA試驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3 .59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至000ml。
(4) ELISA試驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運用液:
TMB(0mg/5ml無水乙醇) 0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 0ml
0.75%H2O2 32μl
(5) ELISA試驗洗刷緩沖液(PH7.4 PBS):0.5M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·2H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至000ml。
(6)規(guī)范品稀釋液:
PBS L配方pH7.2-7.4.濃度0.0mol/L:
L酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
L酸氫二鈉(Na2HPO4):.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
KCl 0.2g,加去離子水約800mL充分拌和溶解,然后參加濃鹽酸或許氫氧化鈉調(diào)pH至7.2-7.4,后定容到L,濃度為0mmol/L。
(7) ELISA試驗稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.克
加洗刷緩沖液至00ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗刷液配成5~0%運用。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合保存。
為了保證ELISA試驗的準確性,試驗操作中參加的緩沖液和各組分一定要準確,將洗刷液參加酶標板中的時候避免參加的試劑混入別的一個酶標孔,謹防交叉污染。
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