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初級(jí)會(huì)員 | 第13年

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elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前樣本的處理方法

時(shí)間:2020/4/26閱讀:738
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在采集樣品之前必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,清楚要測試的成分是否足夠穩(wěn)定。同一回采集的ELISA樣本被及時(shí)存放在4℃。對(duì)于第二天測試的樣本,樣品應(yīng)在加載后的-20℃及時(shí)冷凍。如果有條件,將它們冷凍到-70℃。標(biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

液體標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸水和腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等。

一、血清

室溫自然凝固0-20分鐘后,將血液離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集清洗。如果保存過程中出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

二、等離子體

應(yīng)根據(jù)樣品的要求選用EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑?;旌?-20分鐘后,離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

三、尿液

用無菌管收集,離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集清洗。如果保存過程中有沉淀形成,應(yīng)再次離心。根據(jù)這一做法,以胸水、胸水和腦脊液(腦脊液)為參考。

四、細(xì)胞培養(yǎng)上清

檢測分泌成分時(shí),用無菌管收集,離心20分鐘(每分鐘2000-3000轉(zhuǎn)),仔細(xì)收集。

五、培養(yǎng)細(xì)胞

檢測細(xì)胞內(nèi)組分時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度約為00萬/ml。通過反復(fù)凍融或添加組織蛋白提取劑,細(xì)胞被破壞,細(xì)胞內(nèi)成分釋放。離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集清洗。如果保存過程中有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

六、組織標(biāo)本

切完標(biāo)本后,稱重。加入一定量的PBS,pH7.4。用液氮快速冷凍。試樣熔化后溫度保持在2-8℃。加入一定量的PBS(pH7.4)或組織蛋白提取劑,樣品用手或勻漿機(jī)均勻化。離心20分鐘左右(2000-3000 rpm)。仔細(xì)收集清洗。一份經(jīng)過單獨(dú)加載后將進(jìn)行測試,其余的將被冷凍并存放。(內(nèi)容僅供參考,如有問題或遇到問題請?jiān)诰€咨詢,我們會(huì)竭誠為您服務(wù))

 

 

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