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人CXC趨化因子配體6操作步驟:
. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔0孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品00μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取00μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘。
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體
載脂蛋白C3抗體
細(xì)胞凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體
染色體脆弱性相關(guān)基因抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體
酰基合成酶家族4抗體
酸性磷酸酶樣蛋白2抗體
AHNAK核蛋白2抗體
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體
p53誘導(dǎo)蛋白5抗體
錨蛋白重復(fù)域5抗體
腦鈉通道蛋白2抗體
腦鈉通道蛋白4抗體
小腸鈉通道蛋白5抗體
APXL蛋白抗體
酸敏感離子通道蛋白3抗體
天β羥化酶抗體
加壓素受體2抗體
細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白樣蛋白3抗體
膜粘連蛋白8抗體
水通道蛋白8抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體
凋亡抑制因子5抗體
水通道蛋白-3抗體
載脂蛋白D抗體
丁?;铣擅?抗體
脂肪細(xì)胞源性氨基肽酶抗體
線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體
ABL2蛋白抗體
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