人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒洗滌方法：

. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?0μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 00μl(在使用前5分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育小時(shí)。

3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前5分鐘內(nèi)配制)00μl，加上覆膜，37℃溫育小時(shí)。

5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液00μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育5分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng)，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。

9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞

mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

 細(xì)胞名稱

人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

人羊膜上皮細(xì)胞

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞

 細(xì)胞名稱

NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞

H9c2大鼠心肌細(xì)胞（ATCC來源）

NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）

HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系

CHO, 中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞系

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞

SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞

BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞

HET-A, 人食管上皮細(xì)胞

RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞

GC-, 鼠精原細(xì)胞

293A，人胚腎上皮細(xì)胞系（腺病毒包裝級(jí)別）

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細(xì)胞

293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系

EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞

HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞

HUVEC-2, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系

HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞