人轉錄因子E2F1試劑盒激活方法:
1. 將450ul 標本稀釋液加入到一支 1.5ml 進口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血漿標本。
2. 加20ul 1 N HC I ,蓋緊,上下混勻。 2 - 8 ℃ 放置60± 2 分鐘。
3. 加20ul 1 N NaOH, 蓋緊,上下混勻。
4. 即用,或放-20/-70 ℃ 保存3 天。計算結果時乘 以稀釋倍數 50 。 ( 注意:不同的標本E2F1 的水平可能有較大差異,請根據實際情況靈活掌握稀釋度)
5. 細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿 10 倍稀釋 (410ul 的標本稀釋液+ 50ul 樣本+ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。
檢測程序
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品(已激活) 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入第一抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2
人腎小管上皮細胞;HKC
人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2
人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2
人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1
人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1
人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2
人胚胎腸粘膜組織來源細胞;CCC-HIE-2
人胚胎胰腺組織來源細胞;CCC-HPE-2
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2
人葡萄膜黑色素細胞;UM
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17
293來源病毒包裝細胞;ΦA
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP
人永生化表皮細胞;HaCaT
SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13
人乳腺上皮細胞;MCF-10A
人胚肺成纖維細胞;MRC-5
人胚肺二倍體細胞;2BS
人胚肺二倍體細胞;KMB-17
人胚腎細胞;293 [HEK-293]
人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC
人肺細胞;HLF-a
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]
人胚肺成纖維細胞;HFL1
人胚腎細胞;293 [HEK-293]
人羊膜細胞;HA
人胚肺成纖維細胞;HFL-I
人肝細胞;HL-7702[L-02]
人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701]
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
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