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Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa)免疫組化實驗原理:
根據(jù)抗原抗體反應和化學顯色原理,組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結合,再利用一抗與標記、熒光素等的二抗進行反應,前者再用標記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗(如鏈霉親和素等)結合,zui后通過呈色反應或熒光來顯示細胞或組織中化學成分,在光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應產(chǎn)物,從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。
Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa)免疫組化主要步驟:
(一)切片制備. 洗載玻片:將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中,目的是為了將載玻片上的硅膠等除去,同時使一些肉眼看不見的凹凸不平的表面變平整,便于組織吸附,然后置于清水中清洗,除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4 (大約沖一個小時左右),再將載玻片浸泡于酒精之中,然后放到架子上,置于37°C溫箱中,將多聚賴氨酸涂布于玻片的表面,由于Lys帶正電,而大多數(shù)的組織帶負電荷,從而產(chǎn)生吸附作用。
2. 包埋組織:先在鐵模具中加入一些液態(tài)石蠟,先稍微冷卻,然后再將待包埋的組織置于石蠟之中,并排列整齊,再將塑料模具盒蓋上,zui后加入少許液體石蠟,進行冷凍,使石蠟變成固態(tài)。
3. 切片:將包埋好的組織從模具上取下來,并置于石蠟切片機上,切片機通過調節(jié)上下左右來使組織和切割方向*,然后調節(jié)切片的厚度,一般為5mm, 如果比較難切,則可以適當調整厚度。用小鑷子將包含有完整組織的載玻片置于40°C溫水中。
4. 撈組織:當組織載玻片置于40°C溫水中之前,要先將水浴中的氣泡趕走,以免氣泡受熱上浮而貼到組織上,組織受熱展開,是組織不起皺紋,用載玻片撈組織時,一般取載玻片的下/3或者下/2一般每種組織撈5-6張,其中2-3張是備用的,每張載玻片上通常撈兩份組織,做對照使用,這樣形成的誤差就比較小了,而且撈載玻片的時候方向*,以便觀察,再將撈出來的載玻片置于架子上,放入37°C溫箱中烘干。Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa)
GOY-S0 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa) 20次/00微升
GOY-S02 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kD) 50次/250微升
GOY-S03 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(窄譜,2-73kDa) 00次/500微升
GOY-S04 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(中譜,2-05kDa) 20次/00微升
GOY-S05 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(中譜,2-05kDa) 50次/250微升
GOY-S06 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(中譜,2-05kDa) 00次/500微升
GOY-S07 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(寬譜,2-220kDa) 20次/00微升
GOY-S08 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(寬譜,2-220kDa) 50次/250微升
GOY-S09 Western Blot 彩虹 預染蛋白質分子量標準(寬譜,2-220kDa) 00次/500微升
GOY-S0 窄譜 預染蛋白質分子量標準(藍色,2-7lkDa) 20次/00微升
GOY-S 窄譜 預染蛋白質分子量標準(藍色,2-7lkDa) 50次/250微升
GOY-S2 窄譜 預染蛋白質分子量標準(藍色,2-7lkDa) 00次/500微升
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