硝酸纖維素膜（NC）Western Blot隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn)，使許多疑難腫瘤得到了明確診斷。在常規(guī)腫瘤病理診斷中，有5%-0%的病例單靠常規(guī)染色難以作出明確的診斷，而借助免疫組化技術(shù)準(zhǔn)確率可高達(dá)98%。

硝酸纖維素膜（NC）Western Blot 免疫組化染色流程
SP法

）脫蠟、水化；2）PBS洗2～3次各5分鐘；

3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室溫靜置0分鐘；

4）PBS洗2～3次各5分鐘；

5）抗原修復(fù)；

6）PBS洗2～3次各5分鐘；

7）滴加正常山羊血清封閉液，室溫20分鐘。甩去多余液體。

8）滴加Ⅰ抗50μl，室溫靜置小時(shí)或者4℃過(guò)夜或者37℃小時(shí)。

9）4℃過(guò)夜后需在37℃復(fù)溫45分鐘。

0）PBS洗3次各5分鐘；

）滴加Ⅱ抗40～50μl，室溫靜置，或37℃小時(shí)；

2）II抗中可加入0.05%的tween-20。

3）PBS洗3次各5分鐘；

4）DAB顯色5～0分鐘，在顯微鏡下掌握染色程度；

5）PBS或自來(lái)水沖洗0分鐘；

6）蘇木精復(fù)染2分鐘，鹽酸酒精分化；

7）自來(lái)水沖洗0～5分鐘；

8）脫水、透明、封片、鏡檢。

SABC法

）脫蠟、水化。

2）PBS洗兩次各5分鐘。

3）用蒸餾水或PBS配置新鮮的3%H2O2，室溫封閉5～0分鐘，蒸餾水洗3次。

4）抗原修復(fù)。

5）PBS洗5分鐘。

6）滴加正常山羊血清封閉液，室溫20分鐘。甩去多余液體。

7）滴加Ⅰ抗，室溫小時(shí)或者4℃過(guò)夜或者37℃小時(shí)（4℃過(guò)夜后在37℃復(fù)溫45分鐘）。

8）PBS洗三次每次2分鐘。

9）滴加化二抗，20℃～37℃20分鐘。

0）PBC洗3次每次2分鐘。

）滴加試劑SABC，20℃～37℃20分鐘。

2）PBS洗4次每次5分鐘。

3）DAB顯色：DAB顯色試劑盒或者自配顯色劑顯色（鏡下掌握顯色程度）。

4）蒸餾水洗。蘇木素復(fù)染2分鐘、鹽酸酒精分化。

脫水、透明、封片、鏡檢。

H-00 增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光試劑（ECL） Western Blot Western Blot 50 ml

H-0 增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光試劑（ECL） Western Blot 00 ml

H-02 增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光試劑（ECL） Western Blot Western Blot 250 ml

H-03 5ⅹWestern Blot 膜封閉液 Western Blot 200 ml

H-04 0ⅹWestern Blot膜沖洗液 Western Blot 000 ml

H-05 增強(qiáng)型HRP-DAB底物顯色試劑盒 Western Blot 00 ml

H-06 增強(qiáng)型HRP-DAB底物顯色試劑盒 Western Blot 500 ml

H-07 TMB底物顯色試劑盒 Western Blot Western Blot 00 ml

H-08 TMB底物顯色試劑盒 Western Blot Western Blot 500 ml

H-09 PVDF膜 Western Blot 20cm×20cm（0張）

H-0 PVDF膜Western Blot 20cm×20cm（25張）

H- 20cm×20cm（0張）

H-2 20cm×20cm（25張）
GOY-S4 Flag融和蛋白純化試劑盒 Western Blot 0次

GOY-S42 HA融和蛋白純化試劑盒 Western Blot 0次

GOY-S43 Myc融和蛋白純化試劑盒 Western Blot 0次

GOY-S44 30%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（37.5:） 00ml

GOY-S45 30%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（37.5:） 500ml

GOY-S46 40%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（37.5:） 00ml

GOY-S47 40%單/雙丙烯酰胺預(yù)制膠溶液 Western Blot（37.5:） 500ml

GOY-S48 丙烯酰胺（Acrylamide） Kg

GOY-S49 丙烯酰胺（Acrylamide） 5 Kg

GOY-S50 N,N-亞甲基雙丙烯酰胺（別名甲叉雙丙烯酰胺） 50 g

GOY-S5 N,N-亞甲基雙丙烯酰胺（別名甲叉雙丙烯酰胺） 250 g