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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2016-03-20 11:54:51瀏覽次數(shù):397次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線CGM(EB 病毒轉(zhuǎn)化的B 細(xì)胞) 具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
CGM(EB 病毒轉(zhuǎn)化的B 細(xì)胞) 用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:60%/L NaCl Peptone Water (SN標(biāo)準(zhǔn))
氯化鈉三糖鐵 50 用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)篩選(SN標(biāo)準(zhǔn))
NaCl Triple Sugar Iron Agar
胰胨大豆瓊脂斜面(TSA) 50 培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細(xì)胞色素氧化酶實(shí)驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
Tryptic Soy Agar
4℃生長培養(yǎng)基 50 用于副溶血性弧菌4℃生長試驗(yàn)
4℃growth Medium (SN標(biāo)準(zhǔn))
O/F培養(yǎng)基(HLGB) 50 用于鑒別弧菌葡萄糖代謝類型(發(fā)酵型或氧化型)(SN標(biāo)準(zhǔn))
O/F Medium
氯化鈉結(jié)晶紫增菌液 50 用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth
氯化鈉蔗糖瓊脂 50 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Sodium Chloride Sucrose Agar
嗜鹽菌選擇性瓊脂 50 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Halophilic Bacteria Selective Agar
氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ) 50 用于副溶血性弧菌的溶血試驗(yàn)
Sodium Chloride Blood Agar Base (GB標(biāo)準(zhǔn))
霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 50 用于霍亂弧菌的生化試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
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