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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2016-03-20 02:34:41瀏覽次數(shù):1384次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線H9c2(2-)(大鼠心肌細(xì)胞)具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長(zhǎng)。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
H9c2(2-)(大鼠心肌細(xì)胞)用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:057 3%NaCl ONPG ml×0 支/盒
060 改良磷酸鹽緩沖液 50g/瓶 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌增菌
3060 改良磷酸鹽緩沖液 5ml× 瓶/箱 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌增菌
060 CIN‐ 培養(yǎng)基基礎(chǔ) 50g/瓶 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌分離
060 CIN‐ 培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加劑 ml×0 支/盒 每支用于00ml060 中
0603 改良Y 培養(yǎng)基 50g/瓶 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌分離
0604 改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基 50g/瓶 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的初步鑒定
3060 改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基斜面 0 支/盒 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的初步鑒定
0603 尿素培養(yǎng)基 3ml×0 支/盒 用于細(xì)菌尿素酶試驗(yàn)
0309 半固體瓊脂 50g/瓶
30308 半固體瓊脂管 ml×0 支/盒 用于細(xì)菌動(dòng)力試驗(yàn)、抗原的準(zhǔn)備和菌種保存
003 營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA) 50g/瓶 用于總數(shù)測(cè)定、菌種純化和傳代
3007 營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板(NA) 90mm×0 個(gè)/包 用于總數(shù)測(cè)定、菌種純化和傳代
00 革蘭氏染色液 0ml×4 支/盒 用于細(xì)菌的革蘭氏染色
060 堿處理液 5ml×0 支/盒 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的樣品堿處理
0604 緩沖葡萄糖蛋白胨水 ml×0 支/盒 用于MR 和VP 試驗(yàn)
0605 甲基紅試劑 0ml× 支/盒 用于甲基紅試驗(yàn)
053 V‐P 試劑 0ml×4 支/盒 50 用于VP 試驗(yàn)
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