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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2016-03-26 00:02:59瀏覽次數(shù):264次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線Lec(卵巢細(xì)胞)具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長(zhǎng)。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過(guò)多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
Lec(卵巢細(xì)胞)用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開(kāi)始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:00 革蘭氏染色液 0ml×4 支/盒 用于細(xì)菌的革蘭氏染色
080 7.5%氯化鈉肉湯 50g/瓶 用于金黃色葡萄球菌的均質(zhì)增菌
3080 無(wú)菌7.5%氯化鈉肉湯 5ml× 瓶/箱 用于金黃色葡萄球菌的均質(zhì)增菌
080 0%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯 50g/瓶 用于金黃色葡萄球菌的增菌
3080 0%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯 5ml× 瓶/箱 用于金黃色葡萄球菌的均質(zhì)增菌
00 磷酸鹽緩沖液(pH7.) 50g/瓶 用于樣品稀釋
300 無(wú)菌磷酸鹽緩沖液(pH7.) 5ml× 瓶/箱 用于樣品稀釋
3003 無(wú)菌磷酸鹽緩沖液(pH7.) 9ml×0 支/盒 用于樣品稀釋
3004 無(wú)菌生理鹽水 5ml× 瓶/箱 含0.85%NaCl,用于樣品稀釋
3005 無(wú)菌生理鹽水 9ml×0 支/盒 含0.85%NaCl,用于樣品稀釋
0803 豆粉瓊脂 50g/瓶 用于配制血瓊脂平板
5070 無(wú)菌裂解脫纖維綿羊血 50ml/瓶
0804 Baird‐Parker 瓊脂基礎(chǔ) 50g/瓶 用于金黃色葡萄球菌分離與計(jì)數(shù)
080 亞碲酸鉀卵黃增菌液 5ml×0 支/盒 每支用于95ml0804 中
30804 Baird‐Parker 瓊脂平板 90mm×0 個(gè)/包 用于金黃色葡萄球菌分離與計(jì)數(shù)
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