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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2016-03-20 00:39:03瀏覽次數(shù):499次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線人雪旺細(xì)胞 具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
人雪旺細(xì)胞用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息: 支原體半流體培養(yǎng)基 50g/瓶 用于支原體的培養(yǎng)
支原體瓊脂培養(yǎng)基 50g/瓶 用于支原體的培養(yǎng)
中華人民共和國獸藥典
獸用生物制品檢驗(yàn)(其余培養(yǎng)基同中國藥典)
編號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 產(chǎn)品說明
073 含硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(T.G) 50g/瓶 用于獸用生物制品的無菌檢驗(yàn)
074 酪胨瓊脂(G.A) 50g/瓶 用于獸用生物制品的活菌檢驗(yàn)
67 改良 Frey 氏培養(yǎng)基基礎(chǔ) 50g/瓶 用于支原體培養(yǎng),每 90ml 培養(yǎng)基中添加 支 5 和 0ml 馬血清
5 改良 Frey 氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加劑 ml×0 支/盒 每支用于 90ml67 或 00ml68 中
68 改良 Frey 氏固體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 50g/瓶 用于支原體培養(yǎng),每 00ml 培養(yǎng)基中添加 支 5 和 0ml 馬血清
69 支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 50g/瓶 用于支原體培養(yǎng),每 90ml 培養(yǎng)基中添加馬血清 0ml、0 倍濃縮 MEM 培 養(yǎng)液 ml 和 支 6
6 支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加劑 ml×0 支/盒 每支用于 90ml69 中
70 支原體固體培養(yǎng)基 50g/瓶 用于支原體培養(yǎng),每 90ml 培養(yǎng)基中添加馬血清 0ml、0 倍濃縮 MEM 培 養(yǎng)液 ml 和 支 6
7 支原體固體培養(yǎng)基添加劑 ml×0 支/盒 每支用于 90ml70 中
003 營養(yǎng)瓊脂(NA) 50g/瓶 菌落總數(shù)、菌種純化和傳代
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