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人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):492次

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人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 細(xì)胞潛伏期(latent phase):細(xì)胞接種后,先經(jīng)過一個在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)的懸浮期.此時,細(xì)胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形.然后細(xì)胞貼附于載體表面,稱貼壁,懸浮期結(jié)束細(xì)胞貼壁速度與細(xì)胞種類,培養(yǎng)基成分,載體的理化性質(zhì)等密切相關(guān)。一般情況下,原代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁速度慢,可達(dá)0-24 小時或更多,而傳代細(xì)胞系貼壁速度快,通常0-30 分鐘即可貼壁。細(xì)胞貼壁后還需經(jīng)過一個潛伏階段,才進(jìn)入生長和增殖期.原代培養(yǎng)細(xì)胞潛伏期,約24-96 小時或更長,連續(xù)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞潛伏期短,僅需6-24 小時。
細(xì)胞指數(shù)增生期logarithmic growth phase) 這是細(xì)胞增殖zui旺盛的階段,分裂相細(xì)胞增多。指數(shù)增生期細(xì)胞分裂相數(shù)量可作為判定細(xì)胞生長是否旺盛的一個重要標(biāo)志。通常以細(xì)胞分裂相指數(shù)(Mitotic index,MI)表示,即細(xì)胞群中每000 個細(xì)胞中的分裂相數(shù)。一般細(xì)胞的分裂指數(shù)介于0.%-0.5%,原 代細(xì)胞分裂指數(shù)較低,而連續(xù)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞分裂相指數(shù)可高達(dá)3%5%。人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞指數(shù)增生期的細(xì)胞是細(xì)胞活力時期,是進(jìn)行各種實驗*時期,也是凍存細(xì)胞的時機。在接種細(xì)胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù)3天后,隨著細(xì)胞數(shù)量不斷增多、生長空間減少,zui后細(xì)胞相互接觸匯合成片。

 正常細(xì)胞相互接觸后能抑制細(xì)胞運動,這種現(xiàn)象稱接觸抑制現(xiàn)象(contact inhibition)。而惡性腫瘤細(xì)胞無接觸抑制現(xiàn)象,能繼續(xù)移動和增殖,導(dǎo)致細(xì)胞向三維空間擴展,使細(xì)胞發(fā)生堆積(piled up)。細(xì)胞接觸匯合成片后,雖然發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,細(xì)胞仍能進(jìn)行增殖分裂,因此細(xì)胞數(shù)仍然在增多。但是,當(dāng)細(xì)胞密度進(jìn)一步增大,培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少,代謝產(chǎn)物增多時,細(xì)胞因營養(yǎng)枯竭和代謝產(chǎn)物的影響,導(dǎo)致細(xì)胞分裂停止,這種現(xiàn)象稱密度抑制現(xiàn)象(Density Inhibition)。

 培養(yǎng)細(xì)胞注意事項:

    實驗進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)0分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)0分鐘以上后,再進(jìn)行下一個細(xì)胞株之操作。

     無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在抬面之無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。

小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實驗衣及手套后才進(jìn)行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少ClassⅡ)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSOTPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。
公司其他類型產(chǎn)品信息:05 大豆-酪蛋白消化物肉湯Fluid Soybean-Casein Digest Broth 50g/瓶 用于藥品無菌檢測
5 沙氏葡萄糖瓊脂Sabouraud Dextrose Agar 50g/瓶 用于霉菌、酵母菌計數(shù)、培養(yǎng)
53 沙氏葡萄糖肉湯Sabouraud Dextrose Broth 50g/瓶 用于霉菌、酵母菌培養(yǎng)
03 結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂Violet Red Bile Glucose Agar 50g/瓶 用于腸道菌計數(shù)
083 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(含葡萄糖和乳糖)Violet Red Bile Agar with Glucose and Lactose 50g/瓶 用于腸道菌選擇性分離和計數(shù)
084 腸道菌增菌肉湯(EE 肉湯)Enterobacteria Enrichment Broth Mossel 50g/瓶 用于腸道菌的增菌培養(yǎng)
086 氯化鈉瓊脂Mannitol Salt Agar 50g/瓶 用于金黃色葡萄球菌選擇性分離
080 兔血漿(檸檬酸鈉)Rabbit Plasma 0.5ml×0 支/盒 用于血漿凝固酶試驗
0347 連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)Fluid Tetrathionate Medium Base 50g/瓶 用于沙門氏菌選擇性增菌
035 碘溶液 ml×0 支/盒 各取 支用于 00ml0347 中
036 0.%煌綠溶液 ml×0 支/盒
033 亮綠瓊脂培養(yǎng)基Brilliant Green-Agar Medium 50g/瓶 用于藥品中沙門氏菌選擇性分離

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