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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2016-03-21 00:18:58瀏覽次數(shù):714次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線PA-(人卵巢畸胎瘤細(xì)胞)具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長(zhǎng)。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
PA-(人卵巢畸胎瘤細(xì)胞)用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
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0034- β-葡萄糖苷酶/β-糖苷酶/β-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶/龍膽二糖酶/纖維二糖酶/苦杏仁苷酶β-Glucosidase from almonds BR,0-40u/mg,杏仁 0u 900--3 900--3β-葡萄糖苷酶 β-葡萄糖苷酶 苦杏仁苷酶β-Glucosidase from almonds
00u
生物技術(shù)級(jí),6u/mg,杏仁 50毫克
0035 α-葡萄糖苷酶/α-D-葡萄糖苷酶/α-葡糖苷酶/α-Glucosidase/Maltase BR,5000u/g,根霉 日本TCI 900-4-7 900-4-7α-葡萄糖苷酶 α-葡萄糖苷酶 α-Glucosidase/Maltase
BR,50u/mg,酵母 00U
50U
重組體,5u/mg,酵母 750U
0036 蛋白酶(枯草桿菌)/枯草桿菌蛋白酶/枯草溶菌素/Proteinase(Bacillus subtilis) BR,500u/mg 50毫克 CAS:904-0- CAS:904-0-蛋白酶(枯草桿菌) 蛋白酶(枯草桿菌) Proteinase(Bacillus subtilis) 50毫克
高純,4000u/mg 50毫克
50毫克
0037 乳suan"脫氫酶(兔?。? L-乳suan"脫氫酶/乳suan"去氫酵素/LDH/LAD/Lactic dehydrogenase(rabbit muscle) BR,30u/mg,粉末 00毫克 900-60-9 900-60-9乳suan"脫氫酶(兔?。?乳suan"脫氫酶(兔?。?LDH/LAD/Lactic dehydrogenase(rabbit muscle)
克
BR,300u/mg,懸浮液 5KU
5KU
00KU
生物技術(shù)級(jí),800-00u/mg,懸浮液 5KU SigmaL500原裝
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